东方百合(Lilium)杂交品种索邦病程相关蛋白(PR1)基因的克隆与原核表达

• 作者: 张玉宝 杨果 杨柳 王乐 王亚军 谢忠奎 郭志鸿
• 来源期刊: 中国沙漠
• 学科: 生物学
• 关键词: 百合(Lilium) 抗病性 病程相关蛋白 同源建模 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 生物与土壤
• 页码范围: 584-591
• 页数: 8页
• 分类号: Q943
• 语种: 中文
• DOI: 10.7522/j.issn.1000-694X.2017.00031

摘要

病程相关蛋白(PR)广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应答.采用cDNA末端快速克隆技术,从东方百合(Lilium)杂交品种索邦中克隆了PR1基因,并命名为LhSorPR1.LhSorPR1基因cDNA全长870 bp,5'非翻译区和3'非翻译区的长度分别为47 bp和274 bp.该基因的开放阅读框为549 bp,编码182个氨基酸.成熟的LhSorPR1蛋白(不含信号肽)分子量为18.19 kDa,等电点为5.69.采用同源建模方式构建的LhSorPR1蛋白三维结构与其模板番茄PR1蛋白p14a具有较高的相似性,说明百合PR1蛋白在结构和功能上与其他植物中的PR1蛋白具有较强的保守性.构建pCold Ⅱ-LhSorPR1原核表达,经IPTG诱导后,目的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式成功表达.使用免疫印迹方法对表达的LhSorPR1重组蛋白进行了验证,并对带有His标签的重组蛋白成功进行了纯化.