副猪嗜血杆菌脂多糖的提取、鉴定及初步应用

• 作者: 丛晓燕 于江 任素芳 吴家强 孙文博 时建立 曾昊 李俊 李建达 杨杰 杨胜男 邱文彬 郭立辉 陈智 陈蕾
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 脂多糖 提取 鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 106-111
• 页数: 6页
• 分类号: S851.3
• 字数: 4021字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2018.09.026

摘要

为建立一种有效提取高纯度副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)的方法,进一步阐明HPS的致病机制,通过热酚水法提取LPS,浓缩后,采用酶解法和超离法纯化提取物,分别用硫酸-苯酚法、BCA法、紫外分光光度法,测定LPS提取物中多糖、蛋白及核酸的含量,通过SDS-PAGE电泳银染方法鉴定提取物.将提取的LPS作用于猪肺泡巨噬细胞,通过荧光定量方法检测IL-1β 的表达量差异.结果显示:纯化的LPS平均产率为2.56％;LPS提取物中不含还原性单糖,多糖含量为3.27％,蛋白含量为0.77％,核酸含量为0.90％;提取的LPS能够引起猪肺泡巨噬细胞IL-1β 表达量显著上调.因此,通过该方法提取纯化的LPS可以用于HPS与宿主细胞间作用机制的研究.