肝活素敲除小鼠肝再生异常

• 作者: 于淼 刘贤 卜雯婧 孟晓竹 杜涵 杨晓明 王宪 陈思聪 陈慧
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠,基因敲除 肝再生 肝切除术 肝损伤 印迹法,蛋白质 肝细胞核因子类
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-168
• 页数: 8页
• 分类号: R657.3
• 字数: 6380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2018.03.001

摘要

目的 探讨肝活素(hepassocin,HPS)基因敲除对小鼠肝再生能力的影响.方法 利用CRISPR/Cas9技术建立HPS基因敲除小鼠模型,分析小鼠体质量、肝质量及肝病理结构等.建立小鼠70%肝切除模型,收集肝切除后各个时间点肝组织,通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)检测p-HDAC3和PCNA的蛋白表达,利用免疫组化检测5-溴脱氧尿苷(BrdU)掺入率,及增殖细胞核抗原(PCNA)和Ki67的表达.采用1%CCl4肝损伤模型,损伤后24 h,收集外周血及肝组织,检测ALT、AST和肝组织HE染色,利用不同浓度的CCl4刺激小鼠肝实质细胞,检测ALT和LDH水平.结果 HPS-/-小鼠与HPS+/+小鼠相比体质量明显增加;HPS基因敲除会延缓70%肝切除手术后小鼠的肝再生并加重CCl4诱导的急性肝损伤.结论 HPS基因敲除造成小鼠肝再生能力减弱,并加重CCl4诱导的肝损伤,提示HPS在肝细胞增殖、抗损伤中发挥重要作用.