周期性应力下胰岛素样生长因子1受体对大鼠软骨细胞功能的影响

• 作者: 刘久翔 刘锋 孙成 梁文卫 程蒋琪 葛雨庆 陈桂文
• 来源期刊: 中华关节外科杂志（电子版）
• 关键词: 力学 受体,胰岛素样生长因子Ⅰ 软骨细胞
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 209-216
• 页数: 8页
• 字数: 5888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-134X.2018.02.012

摘要

目的 探讨周期性机械应力条件下胰岛素样生长因子1型受体( IGF1R)对大鼠软骨细胞增殖及细胞外基质合成的影响.方法 体外分离培养大鼠软骨细胞,随机分为4组:加压0h组、加压0.5 h组、加压1 h组、加压2 h组,采用Western Blot法检测各组细胞IGF1R的表达及磷酸化水平,并在此基础上将同代无处理的软骨细胞在加压各组检测的同时给予同样检测即为静态组,应用Gel-Pro Analyzer软件进行半定量灰度分析比较各时间段静态和加压两两各组磷酸化 IGF1R/总IGF1R水平差异.另取大鼠软骨细胞随机分为静态组、加压对照组、IGF1R阻断组、加压后IGF1R阻断组,IGF1R阻断采用顺式-3-[8-胺基-1-(2-苯基-喹啉-7-基)-咪唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]-1-甲基-环丁醇(OSI-906)或者以IGF1R shRNA两种方式.阻断IGF1R 1 h后Western Blot法检测各组细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)表达及磷酸化水平;8 h后实时荧光定量PCR检测各组2型胶原(collagenⅡ)、蛋白聚糖(aggrecan)表达;3 d后采用直接细胞计数方式及细胞计数试剂盒(CCK-8)对软骨细胞增殖状况进行测定.应用SPSS 18 .0软件进行相关统计学分析,两组间差异采用t检验比较.结果 磷酸化IGF1R/总IGF1R蛋白水平在加压0 h组与静态组之间差异无统计学意义(t=0 .255, P=0 .811),而在0 .5 h组,1 h组,2 h组较相对应的静态组增高,差异具有统计学意义(t=-5 .881、-6.172、-10.518,P均小于0 .05). IGF1R被OSI-906或shRNA抑制后,加压处理的ERK 1/2磷酸化水平显著降低(OSI-906阻断后t=3 .074,shRNA阻断后t=3 .990,P均小于0.05),细胞外基质collagenⅡ(OSI-906阻断后t=3 .243, shRNA阻断后t=3 .621,均为P<0.05)、aggrecan(OSI-906阻断后t=3.128,shRNA阻断后t=3.608,P均小于0.05)基因表达水平显著降低,大鼠软骨细胞增殖能力减弱,差异均具有统计学意义(OSI-906阻断后t=2 .835、shRNA阻断后t=3.467,均为P<0 .05).结论 周期性机械应力通过压力感受器IGF1R将机械信号转变为生物化学信号,激活ERK 1/2信号通路促进软骨细胞增殖和细胞外基质合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘锋	南京医科大学第一附属医院骨外科	58	435	11.0	18.0
2	孙成	南京医科大学第一附属医院骨外科	2	8	1.0	2.0
3	葛雨庆	南京医科大学第一附属医院骨外科	2	1	1.0	1.0
4	梁文卫	南京医科大学第一附属医院骨外科	2	1	1.0	1.0
5	刘久翔	南京医科大学第一附属医院骨外科	2	9	1.0	2.0
6	陈桂文	南京医科大学第一附属医院骨外科	2	1	1.0	1.0
7	程蒋琪	南京医科大学第一附属医院骨外科	1	1	1.0	1.0