摘要:
目的 研究邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯(DEHP)对MCF-7细胞的氧化损伤作用,探讨3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)基因沉默或高表达对DEHP致氧化损伤作用的影响.方法 体外培养MCF-7细胞、3β-HSD基因沉默细胞、3β-HSD基因高表达细胞,DEHP对细胞染毒,以MCF-7细胞为对照,不同浓度DEHP(0.00、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80 mmol/L)分别染毒24 h,测定3种细胞内氧化损伤指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的变化,荧光定量PCR检测DNA损伤修复基因hOGG1、hMTH1 mRNA表达变化, Western blot法检测hOGG1、hMTH1蛋白表达变化.结果 DEHP染毒MCF-7细胞后,与对照组(DEH P 0 mmol/L)比较,MDA含量升高,SOD活力、GSH含量、GSH-PX活力降低,hOGG1、hMTH1 mRNA表达水平升高,hOGG1、hMTH1蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).DEHP染毒3β-HSD沉默细胞后,与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞中MDA含量升高,SOD活力、GSH含量、GSH-PX活力降低,hOGG1、hMTH1 mRNA表达水平降低,hOGG1、hMTH1蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).DEHP染毒3β-HSD高表达细胞后,与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD高表达细胞中MDA含量降低,SOD活力、GSH含量、GSH-PX活力升高,hOGG1、hMTH1 mRNA表达水平升高,hOGG1、hMTH1蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 DEHP可引起MCF-7细胞发生氧化损伤,诱导相关基因及蛋白发生改变;3β-HSD基因沉默使DEHP致氧化损伤加重,3β-HSD基因高表达使DEHP致氧化损伤减轻, 3β-HSD基因在DEHP致氧化损伤中具有重要作用.