自噬在骨保护素对破骨细胞及其前体凋亡过程的调控机制

• 作者: 刘宗平 刘庆羊 孙自强 宋瑞龙 赵鸿雁 顾建红
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 破骨细胞 RAW264.7 骨护素 自噬 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 临床兽医
• 页码范围: 1761-1769
• 页数: 9页
• 分类号: S813.1
• 字数: 5040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.08.022

摘要

为了探讨骨保护素(osteoprotegerin,OPG)对破骨细胞及其前体自噬与凋亡的影响,本研究以RAW 264.7细胞诱导分化形成的破骨细胞(osteoclasts,OCs)及其前体(osteoclast precursors,OCPs)为研究对象,通过自噬促进剂雷帕霉素(rapamycin,RAP)或自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)分别预处理1h和30 min后,再添加80 ng·mL-1OPG作用细胞6h,试验分为对照组(Con)、OPG、CQ、CQ+ OPG、RAP和RAP+ OPG组,利用免疫印迹法(Western blot)检测细胞自噬相关蛋白;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率.结果显示,与对照组相比,OPG组OCPs的Atg5和Beclin-1水平极显著或显著上调(P＜0.01或P＜O.05),但LC3-Ⅱ无显著差异(P＞0.05);与OPG组相比,RAP+ OPG组OCPs中的LC3-Ⅱ水平极显著上调(P＜0.01);与对照组相比,OPG组OCs中LC3-Ⅱ、Atg5和Beclin-1水平极显著下调(P＜0.01);与OPG组相比,RAP+ OPG组OCs的Atg5和Beclin-1水平极显著下调(P＜0.01).与对照组相比,OPG处理组和RAP+OPG组OCPs凋亡率极显著上升(P＜0.01),CQ+OPG组凋亡率无显著差异(P＞0.05);RAP+OPG比OPG组OCPs凋亡率极显著增加(P＜0.01);与对照组相比,OPG组OCs凋亡率极显著降低(P＜0.01),CQ+OPG组凋亡率极显著下降(P＜0.01),RAP+ OPG组凋亡率极显著下降(P＜0.01).表明OPG能够促进OCPs发生自噬,而自噬的激活促进了OCPs的凋亡;OPG抑制OCs自噬的发生,并且抑制和激活自噬都能抑制OCs的凋亡.