根癌农杆菌介导的香石竹遗传转化体系建立

• 作者: 但乃震 傅小鹏 包满珠 孔维龙 李丹丹 王翠
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 香石竹 农杆菌介导 遗传转化体系 高效
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 页码范围: 34-44
• 页数: 11页
• 分类号: Q311
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2018.04.05

摘要

为获得香石竹最佳转化体系及稳定表达的转基因植株,以香石竹组培苗叶片为材料,研究农杆菌菌种、香石竹基因型、预培养天数、侵染方式、共培养方式和时间等多个因素对香石竹遗传转化的影响.结果表明:香石竹转化的最佳方式是预培养2d,采用LBA4404农杆菌缓冲液摇床摇12 min(200 r/min),静置3 min的侵染方式.侵染后叶片外植体接种于50 μmol/L乙酰丁香酮(AS)溶液浸湿的无菌滤纸(3层),进行黑暗共培养5d.不同基因型对比结果表明:‘小桃红’的抗性芽分化率优于‘马斯特’和‘锦葵钛合金’.60 mg/L卡那霉素(Kan)浓度对3个基因型的香石竹品种均有较好的抗性芽筛选效果,0.5 mg/L吲哚丁酸(IBA) +0.22 mg/L噻苯隆(TDZ)培养基是分化效率高、丛芽多、生长状态好的直接出芽培养基.本研究建立的的香石竹遗传转化体系,重复性好、转化效率高、基因型依赖较小,该体系能显著提高DcaPIP1;1基因的转化效率.