miR-101表达上调对视网膜母细胞瘤细胞的增殖及侵袭能力的抑制作用

• 作者: 徐军 徐卫星 李佳 李勇
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜母细胞瘤 miR-101 EZH2 增殖 侵袭
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 527-532
• 页数: 6页
• 分类号: R774.1
• 字数: 6061字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2018.0123

摘要

目的 探究miR-101对视网膜母细胞瘤增殖及侵袭能力的影响.方法 收集31例视网膜母细胞瘤组织及7例正常视网膜组织.培养人正常视网膜血管内皮细胞系ACBRI-181及视网膜母细胞瘤系HXO-Rb44.Lipofectamine 2000转染HXO-Rb44细胞并分组:阴性对照(normal control,NC)1组[转染microRNA (miR)-101阴性对照物]、miR-101表达组(转染miRNA-101类似物);NC 2组[转染组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)阴性对照序列]、siRNA-EZH2组(转染EZH2siRNA)、siRNA-EZH2+ mimics组(转染EZH2siRNA和miRNA-101类似物)和EZH2+ mimics组(转染EZH2表达载体和miRNA-101类似物).正常HOX-Rb44细胞作为空白组.采用qRT-PCR检测miR-101、EZH2 mRNA表达,Western blot检测EZH2蛋白表达.M TT及Transwell实验分别测定细胞增殖及侵袭能力.荧光素酶报告基因实验确定miR-101和EZH2的靶向关系.裸鼠体内移植实验测定细胞体内增殖能力.结果 与正常视网膜组织和ACBRI-181细胞相比,视网膜母细胞瘤组织及HXO-Rb44细胞中miR-101的相对表达量均明显下调(均为P＜0.05).EZH2 mRNA及蛋白在miR-101表达组中的相对表达量均显著低于空白组和NC1组(均为P＜0.05).72 ～96 h,miR-101表达组的吸光度(A)值均显著低于空白组及NC1组(均为P＜0.01).miR-101表达组侵袭细胞数量(51±6)均显著低于空白组(97±11)及NC1组(92±8)(均为P＜0.01).EZH2是miR-101的靶基因.48～96 h,siRNA-EZH2组和siRNA-EZH2+ mimics组的A值均显著低于空白组和NC2组(均为P＜0.01);72 ～96 h,siRNA-EZH2+mimics组的A值明显低于siRNA-EZH2组(P ＜0.05);24 ～96 h,EZH2+ mimics组的A值与空白组和NC2组之间的差异均无统计学意义(均为P＞0.05).siRNA-EZH2组侵袭细胞数量(48±4)和siRNA-EZH2+ mimics组(38±3)均显著低于空白组(95±10)和NC2组(90±6)(均为P＜0.01),siRNA-EZH2+ mimics组侵袭细胞数量明显低于siRNA-EZH2组(P＜0.05),EZH2+mimics组侵袭细胞数量与空白组和NC2组之间的差异均无统计学意义(均为P＞0.05).裸鼠体内移植5～7周,siRNA-EZH2组和siRNA-EZH2+ mimics组的瘤体体积均显著低于空白组和NC2组(均为P＜0.01),siRNA-EZH2+ mimics组的瘤体体积明显低于siRNA-EZH2组(P＜0.05),EZH2+ mimics组的肿瘤体积与空白组和NC2组之间的差异均无统计学意义(均为P＞0.05).结论 miR-101上调后可抑制HXO-Rb44细胞的增殖及侵袭能力,这可能是通过抑制EZH2表达实现的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐军	锦州医科大学附属第一医院眼科	14	47	5.0	6.0
2	徐卫星	锦州医科大学附属第一医院眼科	6	25	4.0	4.0
3	李勇	锦州医科大学附属第一医院眼科	2	10	2.0	2.0
4	李佳	锦州医科大学附属第一医院眼科	5	7	2.0	2.0