甜樱桃(Prunus avium L.)LEAFY基因的克隆及表达模式分析

• 作者: 倪杨 周宇 张开春 张晓明 段续伟 王晶 闫国华
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甜樱桃 LEAFY 克隆分析 花芽分化
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 页码范围: 14-23
• 页数: 10页
• 分类号: S662.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2018.04.03

摘要

为探索LEAFY基因在甜樱桃花芽分化过程中的表达及作用,以甜樱桃(Prunus avium)‘红蜜’(Hongmi)为试材,利用同源克隆和RACE方法克隆甜樱桃中LEAFY同源基因cDNA全序列,对其序列进行分析,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对该基因在花芽分化过程中的表达量进行鉴定.结果显示:在甜樱桃中具有3中不同长度类型,分别为1 532、1 498和1 410 bp,主要由3'UTR区长度不同所导致,开放阅读框长1 233 bp,编码410个氨基酸,推测蛋白分子量约为45.6 ku,等电点约为6.88.结构预测NCBI序列比对发现其氨基酸序列与其他植物中同源基因相似性均在70％以上,故命名为PaLEAFY.qRT-PCR分析发现,在果实成熟至成熟后33 d,PaLEAFY在花芽中的表达量由高变低,果实成熟后45 d,PaLEAFY表达量开始急剧升高并维持至69 d,69 d之后表达量再次升高,并于果实成熟后99 d达到最高.此外,PaLEAFY在甜樱桃花的柱头中的表达量最高,其次是花瓣、雄蕊和花萼,在甜樱桃的茎和叶中的表达量非常低.说明PaLEAFY参与甜樱桃花芽分化及花发育过程.