荆防药对正丁醇提取部位抗炎作用的NF-κB信号通路机制研究

• 作者: 刘小波 吕红君 曾南 杨清鑫 桑文涛 石博宇 罗杰 饶志粒
• 来源期刊: 北京中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 荆防药对正丁醇提取部位 脂多糖 急性肺损伤 小鼠 RAW264.7细胞 核转录因子-κB
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 科技之窗
• 页码范围: 959-968
• 页数: 10页
• 分类号: R285.5
• 字数: 7353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2157.2018.11.012

摘要

目的 观察荆防药对正丁醇提取部位对气管滴注脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤(ALI)模型及LPS刺激诱导的小鼠单核巨噬白血病细胞(RAW264.7细胞)炎症模型的保护作用,探讨其抗炎效应的核转录因子-κB(NF-κB)信号通路机制.方法 ①小鼠ALI模型:将雄性昆明种小鼠分为空白对照组,假手术组,模型组,地塞米松(5 mg/kg)+LPS组,荆防药对正丁醇部位低、中、高剂量(3.33、6.67、10.01 g/kg)+LPS组,除地塞米松组于实验第2、4、5天腹腔注射给药1次外,其余各组动物连续灌胃给药5 d,1次/d,空白对照组、假手术组和模型组给予等体积0.5％吐温溶液.末次给药30 min后,除空白对照组和假手术组外其余各组小鼠气管滴注LPS 100μL(5 mg/kg)制备小鼠ALI模型,假手术组小鼠行麻醉、气管滴注操作,但给予无菌生理盐水.造模后5 h各组再次给药1次,给予LPS后6 h处死小鼠,取小鼠肺组织进行病理形态学观察,Real-Time PCR法检测小鼠肺组织NF-κB p65、NF-κB p50、IκBαmRNA表达水平,Western-Blot法检测小鼠肺组织NF-κB p50蛋白表达水平.②RAW264.7细胞炎症模型:取对数期RAW264.7细胞悬液接种、培养24 h贴壁后,设空白对照组,LPS组(1 mg/L),LPS+DMSO对照组,LPS+地塞米松(5 mg/L)组,LPS+荆防药对正丁醇部位高、低剂量组(50、25 mg/L),LPS+5-O-甲基维斯阿米醇苷高、低剂量组(50、25 mg/L),LPS+橙皮苷组(50μg/L),LPS+迷迭香酸组(5 mg/L).受试药物预处理3 h,除空白对照组外其余各组均加入1 mg/L LPS刺激12 h造模,吸取细胞上清,Griess法测定一氧化氮(NO)含量,ELISA法测定白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;裂解细胞,Real-Time PCR法检测细胞NF-κB p65、NF-κB p50和IκBαmRNA表达水平.结果 ①与LPS所致小鼠ALI模型组比较,荆防药对正丁醇部位各剂量组可减少ALI小鼠肺组织嗜中性粒细胞计数,其中低剂量组降低作用显著(P<0.01);荆防药对正丁醇部位中、低剂量组显著下调ALI小鼠肺组织NF-κB p65 mRNA及NF-κB p50蛋白表达水平(P<0.01),中剂量组亦明显下调NF-κB p50 mRNA表达水平(P<0.05).②与细胞炎症模型组比较,所有受试药物均能明显降低细胞上清IL-6水平(P<0.01或P<0.05),荆防药对正丁醇部位(50、25 mg/L)、5-O-甲基维斯阿米醇苷低剂量组可显著降低细胞上清NO含量(P<0.01或P<0.05),荆防药对正丁醇部位高剂量组有减少细胞上清TNF-α含量的趋势;荆防药对正丁醇部位低剂量组显著下调细胞NF-κB p65、NF-κB p50、IκBαmRNA表达水平(P<0.05或P<0.01),高剂量组明显抑制细胞NF-κB p50、IκBαmRNA表达(P<0.05或P<0.01),5-O-甲基维斯阿米醇苷和橙皮苷亦可显著下调细胞NF-κB p50 mRNA表达水平(P<0.05),迷迭香酸明显抑制模型细胞NF-κB p50和IκBαmRNA表达的上调(P<0.05).结论 荆防药对正丁醇提取部位具有抗急性炎症作用,抗炎作用发挥与抑制NF-κB信号通路中关键因子NF-κBp65、NF-κB p50、IκBα基因及NF-κB p50蛋白表达有关,5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷与迷迭香酸可能为其主要有效物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾南	成都中医药大学药学院	135	1144	19.0	30.0
2	罗杰	成都中医药大学药学院	12	6	1.0	2.0
3	刘小波	成都中医药大学药学院	9	6	1.0	2.0
4	吕红君	成都中医药大学药学院	5	3	1.0	1.0
5	杨清鑫	成都中医药大学药学院	5	3	1.0	1.0
6	桑文涛		6	16	3.0	3.0
7	饶志粒	成都中医药大学药学院	6	6	1.0	2.0
8	石博宇	成都中医药大学药学院	7	6	1.0	2.0