甘蓝型油菜和甘蓝CRISPR/Cas9编辑效果的快速检测

• 作者: 刘东晓 吴健 吴德伟 孙勤富 林俐 王幼平
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: CRISPR/Cas9 甘蓝型油菜 甘蓝 基因组编辑 突变检测
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 737-744
• 页数: 8页
• 分类号: S565.403
• 字数: 5257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2018.06.001

摘要

CRISPR/Cas9系统是目前最常用的基因组定点编辑工具,通过瞬时表达试验提前验证Cas9/sgRNA载体诱导的突变效率,可以提高基因组定点编辑的成功率,且显著节省费用及时间.本研究开发了一种利用农杆菌介导的操作简单、适用性好、成本低廉的叶片瞬时表达技术,可用于快速检测甘蓝型油菜和甘蓝中CRISPR/Cas9的编辑效果.针对甘蓝型油菜Bna C. WRKY11. a基因设计了2个靶位点Tgt1(Target 1)和Tgt2(Target 2),并构建了Cas9/sgRNA-Tgt1/2多重突变载体,在甘蓝型油菜叶片中瞬时表达后,2个靶位点都出现突变,突变效率达11.2％～82.2％.针对甘蓝Bol PDS3基因设计了1个靶位点Tgt3(Target3),并构建了Cas9/sgRNA-Tgt3敲除载体,在甘蓝叶片瞬时表达后,Tgt3发生了突变,且大部分为碱基缺失突变,缺失的数目为1～18bp不等,同时还存在少量碱基插入以及碱基替换等突变类型.结果表明这种甘蓝型油菜和甘蓝的叶片瞬时表达技术操作简单、适用性好、成本低廉,可用于CRISPR/Cas9的编辑效果快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王幼平	扬州大学生物科学与技术学院	58	315	10.0	15.0
2	吴健	扬州大学生物科学与技术学院	45	79	5.0	7.0
3	吴德伟	扬州大学生物科学与技术学院	2	4	1.0	2.0
4	孙勤富	扬州大学生物科学与技术学院	3	1	1.0	1.0
5	林俐	扬州大学生物科学与技术学院	2	1	1.0	1.0
6	刘东晓	扬州大学生物科学与技术学院	1	1	1.0	1.0