虫草素通过ERK1/2、Ezrin和Akt信号通路抑制 胆囊癌细胞SNU-308的增殖和迁移

• 作者: 任香善 刘小庆 刘特思 吕游 朴英实 林贞花 王雪 闫文帝
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 虫草素 胆囊癌 细胞增殖 迁移 Akt信号通路 ERK1/2信号通路
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1434-1442
• 页数: 9页
• 分类号: R735.8|R285.5
• 字数: 5221字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.08.014

摘要

目的:探讨虫草素对胆囊癌细胞SNU-308增殖和迁移的影响及其分子机制.方法:MTT法和平板集落形成实验检测不同浓度虫草素对胆囊癌SNU-308细胞活力和集落形成能力的影响;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞凋亡和自噬相关蛋白以及Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平;免疫荧光染色法检测细胞内LC3的表达水平;划痕愈合实验和Transwell实验检测虫草素对胆囊癌细胞迁移能力的影响;划痕实验检测Akt抑制剂和ERK1/2抑制剂及Ezrin基因沉默对细胞迁移能力的影响.结果:虫草素可显著抑制胆囊癌细胞的活力和集落形成能力(P<0.05).流式细胞术结果显示,虫草素可诱导胆囊癌细胞凋亡(P<0.05).Western blot结果显示,虫草素处理后Bcl-2表达降低,Bax、细胞色素C(Cyto C)、Fas、FasL和cleaved caspase-3蛋白水平升高,自噬标识蛋白LC3-II/I比例和beclin 1表达上调(P<0.05).免疫荧光染色结果显示,虫草素处理后SNU-308细胞胞浆中LC3荧光颗粒的数量明显增多.划痕实验和Transwell实验结果显示虫草素可抑制细胞迁移(P<0.05).虫草素明显抑制Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平(P<0.05).Ezrin基因沉默及Akti-1/2和GDC-0994均可抑制胆囊癌细胞的迁移作用(P<0.05).结论:虫草素通过诱导凋亡和自噬抑制胆囊癌细胞的增殖和迁移,其机制可能与调控ERK1/2,Ezrin和Akt信号通路有关.