鸡球虫共同抗原UCE免疫原性分析及其对多种球虫感染的免疫保护效果评估

• 作者: 严若峰 刘剑华 刘连瑞 宋小凯 徐立新 李灵娟 李祥瑞
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡球虫 共同抗原 泛素缀合酶结构域蛋白(UCE) 免疫原性 混合感染
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 496-503
• 页数: 8页
• 分类号: S855.9
• 字数: 4816字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201801008

摘要

[目的]在前期研究中,筛选到了存在于多种鸡球虫间的共同抗原泛素缀合酶结构域蛋白(UCE),本研究进一步分析其免疫原性,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果.[方法]提取纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增堆型艾美耳球虫UCE基因(EaUCE),插入pVAX1质粒,构建真核表达质粒pVAX-EaUCE,通过RT-PCR和Western blot检测pVAX-EaUCE在鸡体内的转录和表达情况.经流式细胞术和间接ELISA法检测pVAX-EaUCE免疫后鸡体细胞免疫和体液免疫水平变化,分析其免疫原性.分别采用柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫及三者的混合卵囊人工感染雏鸡,观察感染前、后雏鸡体质量变化和排出卵囊减少量,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果.[结果]EaUCE基因开放阅读框为444 bp,编码148个氨基酸,BLAST分析显示,柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫UCE氨基酸序列同源性均大于95%.pVAX-EaUCE能够在鸡体内成功转录和表达.pVAX-EaUCE免疫后,鸡体的CD+4/CD+3和CD+8/CD+3细胞比例显著升高,IFN-γ、IL-2、IL-4、TNFSF15、IL-17D、TGF-β4 mRNA和IgY抗体水平显著升高,表明免疫该质粒能诱导细胞和体液产生免疫反应(P<0.05).pVAX-EaUCE免疫后,与对照组相比,免疫组鸡体质量显著增加,卵囊产量明显下降,肠道损伤也相应减轻.[结论]鸡球虫共同抗原UCE具有良好的免疫原性,可对多种球虫感染提供部分免疫保护力,有望成为抵抗多种球虫感染的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李祥瑞	南京农业大学动物健康与食品安全国际实验室	126	1418	20.0	33.0
2	徐立新	南京农业大学动物健康与食品安全国际实验室	57	304	11.0	14.0
3	严若峰	南京农业大学动物健康与食品安全国际实验室	53	256	10.0	13.0
4	李灵娟		18	6	1.0	1.0
5	刘剑华	南京农业大学动物健康与食品安全国际实验室	2	6	1.0	2.0
6	刘连瑞	南京农业大学动物健康与食品安全国际实验室	1	1	1.0	1.0