旋毛虫5'-nucleotidase基因特征与克隆表达

• 作者: 余祖华 刘明远 吴庭才 廖成水 张春杰 李银聚 杜付玉 王晓利 程相朝 郁川
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 旋毛虫 5'-nucleotidase 克隆 原核表达 生物信息学
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 971-976
• 页数: 6页
• 分类号: S855.9
• 字数: 4377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.186

摘要

目的 研究旋毛虫5'-nucleotidase基因的序列结构特征及其蛋白克隆表达.方法 从旋毛虫获得5'-nucleotid-ase基因的序列,利用生物信息学方法进行系统性分析,并进行原核表达.结果 旋毛虫5'-nucleotidase基因大小为1653 bp,编码550个氨基酸,119个氨基酸残基组成,理论相对分子质量(Mr)为62 kD,分子式为C2800 H4358 N742 O803 S23,等电点为6.13,属于稳定存在的亲水蛋白质.该蛋白含有21个氨基酸组成的信号肽,同时具有跨膜区域,此外还含有3个N-糖基化位点、2个O-糖基化位点、20个磷酸化位点、28个B细胞线性结合位点和13个T细胞结合位点.二级结构中,α-螺旋占43.27％(238个),伸展链占22.73％(125个),β-折叠占7.82％(43个),无规则卷曲占26.18％(144个).SDS-PAGE显示,5'-nucleotidase基因在原核表达系统中呈可溶性形式表达,重组蛋白大小约为74 k D.结论 成功克隆了旋毛虫5'-nucleotidase基因,对其进行序列分析和原核表达,为进一步探究5'-nucleotidase蛋白在旋毛虫感染过程中的作用奠定基础.