一种基于重组聚合酶扩增和纸基电化学发光的核酸检测方法

• 作者: 刘仲明 夏舒 张海燕 李昕 王捷 陈钰
• 来源期刊: 分析科学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 重组聚合酶扩增 电化学发光 核酸检测 纸基
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 627-632
• 页数: 6页
• 分类号: O657.39
• 语种: 中文
• DOI: 10.13526/j.issn.1006-6144.2018.05.010

摘要

基于重组聚合酶扩增(RPA)技术和纸基电化学发光(ECL)技术,结合RPA高特异性、操作简便和ECL高灵敏度、快速等特点,建立了一种新型核酸检测方法.以乙型肝炎病毒(HBV)基因片段的质粒为模板,设计特异性引物,对上游引物进行三联吡啶钌标记,生物素标记下游引物,通过RPA反应形成三联吡啶钌和生物素双标记的扩增子,链霉亲和素磁微球分离扩增子,纸基ECL检测三联吡啶钌信号.考察了上游引物三联吡啶钌标记效果,标记率为74.62％.优化了RPA反应参数条件,表明于30℃扩增20 min即达到最佳核酸扩增效果.在HBV基因质粒模板浓度为0.12～1 200 ng/mL范围内,纸基ECL响应峰面积与其浓度对数值呈现良好的线性关系,检出限(S/N＞3)为1.2 pg/mL.本方法可为在条件有限的现场进行核酸的快速检测提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王捷	广州军区广州总医院医学实验科	255	1186	14.0	20.0
2	刘仲明	广州军区广州总医院医学实验科	115	829	14.0	23.0
3	张海燕	广州军区广州总医院医学实验科	29	171	5.0	12.0
4	陈钰	广州军区广州总医院医学实验科	18	50	4.0	6.0
5	夏舒	华南理工大学生物科学与工程学院	1	0	0.0	0.0
9	李昕	广州军区广州总医院医学实验科	3	2	1.0	1.0