血细胞样本长期低温保存对DNA质量和产量的影响

• 作者: 刘志红 卢颖辉 周敏林 唐蓉 尹茹 曾彩虹 朱萍 窦为娟 贺贝 郑春霞
• 来源期刊: 肾脏病与透析肾移植杂志
• 关键词: 血细胞 长期 低温保存 DNA
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 245-249
• 页数: 5页
• 字数: 4350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-298X.2018.03.009

摘要

目的:探讨血细胞样本长期(10年以上)低温保存后获得DNA的质量和产量情况. 方法:选取南京总医院国家肾脏疾病临床医学研究中心生物样本库低温(-80℃)保存10年以上3 ml抗凝血分离得到的血细胞样本150份,采用全自动核酸提取仪(磁珠法)提取DNA,Nanodrop 2000测定DNA的纯度和产量,琼脂糖凝胶电泳检查DNA完整性. 结果:150份血细胞样本提取的DNAA260/A280平均值为1.84,A260/A230平均值为2.27,产量平均值为187.57 μg.所有样本凝胶电泳均可见DNA条带比较集中,未见弥散分布,分子量≥20 kb.150份DNA中,134份1.7≤A260/A280≤1.9,占89.3％;120份A260/A230≥2.0,占80％;115份1.7≤A260/A280≤1.9且A260/A230≥2.0,占76.7％.143份DNA产量≥10 μg,占95.3％.其中,DNA产量≥10 μg且1.7≤A260/A280≤1.9有132份,占88％.DNA产量≥10 μg,1.7≤A260/A280≤1.9且A260/A230≥2.0有114份,占76％;结论:绝大部分低温保存10年以上的血细胞样本磁珠法提取的DNA质量和产量都可满足下游实验要求.该研究为从长期低温保存的血细胞样本中提取DNA用于科学研究提供参考.