MiR-125a-3p通过MAPK信号通路影响胶质瘤细胞的增殖及凋亡的实验研究

• 作者: 何明亮 刘安民 刘家豪 欧阳乐平 谢琳 黄佐於
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 miR-125a-3p 细胞增殖 细胞凋亡 丝裂原活化蛋白激酶
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1203-1209
• 页数: 7页
• 分类号: R730.264
• 字数: 5354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2018.12.003

摘要

目的 探讨miR-125a-3p对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响及其在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的作用.方法 (1)比较肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中565例胶质瘤组织和10例正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(2)收集中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2015年4月至2018年4月手术切除并经病理检查证实的胶质瘤标本30例,其中低级别脑胶质瘤7例,高级别胶质瘤23例.另外收集同期因手术入路需要和颅脑外伤切除的正常脑组织标本8例.应用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑胶质瘤组织和正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(3)体外培养正常胶质细胞HA1800及人脑胶质瘤细胞U251、U373、U87、U138、T98G,72 h后应用RT-qPCR检测6组细胞miR-125a-3p的表达;(4)取对数生长期的U251、U373细胞,分为无义序列组和miR-125a-3p模拟物组,应用LipofectamineTM 2000分别转染无义序列和miR-125a-3p模拟物.转染后72 h应用RT-qPCR检测2组细胞miR-125a-3p的表达,克隆形成实验检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测2组细胞的凋亡情况,Western blotting检测2组细胞凋亡相关蛋白和MAPK信号通路相关蛋白的表达.结果 (1)TCGA数据库中,胶质瘤组织中miR-125a-3p的表达低于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05).(2)临床收集的正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤标本中miR-125a-3p的表达依次降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与HA1800细胞比较,U251、U373、U87、U138、T98G细胞中miR-125a-3p的表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中U251和U373细胞中miR-125a-3p表达下降得最明显.(4)与无义序列组比较,miR-125a-3p模拟物组U251和U373细胞中miR-125a-3p的表达增加,克隆形成率降低,凋亡率增加,凋亡相关蛋白活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-3、cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-7的表达均增加,磷酸化(p)-P38/MAPK蛋白的表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125a-3p在脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞中表达水平较低,过表达miR-125a-3p可以通过MAPK信号通路抑制胶质瘤细胞的增殖并促进细胞凋亡,其有望为胶质瘤的治疗提供新的潜在靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘安民	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	41	194	8.0	12.0
2	欧阳乐平	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	10	19	2.0	4.0
3	何明亮	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	12	11	2.0	2.0
4	谢琳	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	28	202	7.0	14.0
5	刘家豪	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	5	4	1.0	2.0
6	黄佐於	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	4	0	0.0	0.0