表达禽流感病毒NP和M2融合基因重组乳酸菌的构建及鉴定

• 作者: 张成赛 晋玉北 李琼燕 杨文涛 杨桂连 王春凤 赵金辉
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 NP基因 M2基因 原核表达 重组乳酸菌
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 9-15
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4165字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11751/ISSN.1002-1280.2018.12.02

摘要

为了在乳酸菌中表达H9N2亚型禽流感病毒(AIV)NP和M2基因并检测其反应原性,先以pMD19-T-M2质粒作为模板,采用PCR方法克隆M2全长基因,然后将M2基因亚克隆入pSIP409-pgsA′-NP质粒中,构建重组质粒pSIP409-pgsA′-NP-M2,再将重组质粒pSIP409-pgsA′-NP-M2通过电转化的方法转入植物乳杆菌Lb.plantarum NC8中,制备重组菌NC8-pSIP409-pgsA′-NP-M2并诱导表达,最后通过流式细胞术、免疫荧光和免疫印迹技术验证.结果表明,重组菌NC8-pSIP409-pgsA′-NP-M2能够经诱导表达NP-M2融合蛋白,并且与兔源NP单克隆抗体和抗M2的小鼠血清具有反应原性.试验为后续研究禽流感广谱口服疫苗奠定了基础.