ATP处理导致PC12细胞通透性变化及NaHS的干预作用

• 作者: 张利彬 李东亮 李新娟 李超堃 沈慧 王国红 王璐 赵红岗 马洁 魏琳郁
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: ATP 硫化氢 Pannxin-1 PC12细胞 CBX
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 184-190
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2018.02.008

摘要

目的:观察NaHS(H2S供体)对ATP(三磷酸腺苷)诱导的PC12细胞存活率及膜通透性变化的影响,探讨H2S对抗ATP致伤作用的可能机制.方法:高分化PC12细胞置于含有高浓度ATP的培养基中3h制备细胞损伤模型.在ATP处理前30 min,把NaHS或CBX(生胃酮,Pannxin-1通道阻滞剂)加入培养基中,作为预处理.用CCK-8检测细胞存活率,Flra-2/AM荧光染料检测细胞[Ca2+]i,YO-PRO-1或Lucifer Yellow(荧光黄)荧光染料检测RFU(胞内相对荧光单位),研究NaHS干预后细胞存活率和膜通透性的变化.结果:ATP(3、5mmol/L)处理使PC12细胞存活显著降低,NaHS(200 μmol/L)和CBX(10 μmol/L)预处理均可显著拮抗ATP(3 mmol/L)诱导的细胞存活率下降.ATP(3、5 mmol/L)可使PC12细胞内[Ca2+]i明显增加,而NaHS(200μmol/L)和CBX(10 μmol/L)预处理可使ATP(3 mmol/ L)诱导的胞内[Ca2+]i的增幅明显降低.ATP(3、5mmol/L)使PC12细胞对YO-PRO-1和Lucifer Yellow通透明显增加,而NaHS(200 μmol/L)和CBX(10 μmol/L)预处理可显著阻遏ATP诱导的膜通透性增加.结论:Pannxin-1蛋白在ATP诱导PC12细胞膜孔形成中有重要作用,干预膜孔形成可能是NaHS拮抗ATP损伤作用的机制之一.