RNA干扰DGAT1和DGAT2在猪肝细胞和肌内前体脂肪细胞中表达的研究

• 作者: 任丽群 吴光松 张芸 李平 林鹏飞 燕志宏 顾丽菊
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: RNA干扰 DGAT1基因 DGAT2基因 猪肝细胞 猪肌内前体脂肪细胞
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 91-96
• 页数: 6页
• 分类号: S828.2
• 字数: 4244字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19556/j.0258-7033.2018-07-091

摘要

本研究旨在探索DGAT1和DGAT2基因表达对猪脂肪沉积效率的影响.以3日龄宗地花猪为实验动物,针对DGAT1和DGAT2基因mRNA序列设计6对shRNA序列,构建RNA干扰表达载体,将DGAT1和DGAT2的shRNA干扰载体分别转染至猪的肝细胞和肌内前体脂肪细胞中,采用RT-qPCR筛选出肝细胞和肌内前体脂肪细胞中的最佳shRNA干扰载体,将最佳干扰载体再次转染肝细胞和肌内前体脂肪细胞,测定细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇含量变化.结果表明:所构建的干扰载体对肝细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为78.45％和87.52％,对肌内前体脂肪细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为82.24％和89.82％;肝细胞和肌内前体脂肪细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇的含量均降低,其中转染pGPU6/GFP/Neo-DGAT2-1实验组的肝细胞培养液中甘油三酯含量显著低于空白组(P＜0.05).结果提示,抑制DGAT1和DGAT2基因的表达,可降低猪肝细胞和肌内前体脂肪细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇的含量.