RNA干扰DGAT1和DGAT2基因 在猪肝细胞中的表达

• 作者: 任丽群 吴光松 张芸 李平 杨蓉 林鹏飞 毛同辉 燕志宏 田松军 顾丽菊 魏小红 黄维江
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: RNA干扰 DGAT1基因 DGAT2基因 肝细胞 甘油三酯
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 123-127
• 页数: 5页
• 分类号: S813
• 字数: 3325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.08.020

摘要

为了探索DGAT1和DGAT2基因对宗地花猪脂肪沉积效率的影响,以宗地花猪为试验动物,针对基因DGAT1和DGAT2 mRNA序列设计6对shRNA序列,构建RNA干扰表达载体,将DGAT1和DGAT2的shRNA干扰载体分别转染至肝细胞中,采用荧光定量PCR筛选出最佳shRNA干扰载体,并测定最佳干扰组细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇含量变化.结果显示,所构建的6个shRNA干扰载体均能抑制肝细胞中目的基因的表达,肝细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为78.45％和87.52％.转染干扰效率最佳的载体pGPU6/GFP/Neo-DGAT1-1和pG-PU6/GFP/Neo-DGAT2-1后,肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量均降低,两者差异不显著(P>0.05).转染pGPU6/GFP/Neo-DGAT2-1的肝细胞培养液中甘油三酯含量显著低于空白组(P<0.05),DGAT1干扰载体的干扰效率略低于DGAT2干扰载体(P>0.05).综上,抑制DGAT1和DGAT2基因的表达,可降低肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量.