基于MALDI-TOF/TOF技术的单增李斯特菌四种血清型的快速鉴别

• 作者: 孙冬梅 王娉 赵晓美 闫军 陈颖
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 农学
• 关键词: 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 单增李斯特菌 血清型
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 方法与技术创新
• 页码范围: 138-145
• 页数: 8页
• 分类号: S855.9+9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13304/j.nykjdb.2017.0749

摘要

单增李斯特菌是一种重要的人畜共患病致病菌,其传统血清型鉴定方法具有耗时长、操作繁琐等缺点,现行的多重PCR方法无法精确判定其血清型.基于基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)的快速、准确、高通量等特点,应用该技术建立了单增李斯特菌4种血清型的鉴别方法,以实现食品样品中单增李斯特菌4种血清型的高通量快速甄别.采用优化的MALDI-TOF/TOF条件对4种血清型的单增李斯特菌标准菌株和分离菌株进行检测,发现单增李斯特菌4种血清型的质谱特征峰.选取最优的支持向量机算法,建立基于1/2a、1/2b、1/2c和4b血清型差异的判别模型,运用该模型鉴别4种血清型的单增李斯特菌.初步建立了单增李斯特菌4种血清型的MALDI-TOF/TOF快速鉴别方法.以4种血清型的单增李斯特菌标准菌株为阳性对照、144株食品分离株为检测对象,运用该方法对单增李斯特菌1/2a、1/2b、1/2c、4b四种血清型鉴定符合率分别达到92.7％、90.3％、100％、100％,多重PCR方法的符合率为71.4％、87.0％、96.2％、95.0％.可见,建立的MALDI-TOF/TOF方法可对4种血清型的单增李斯特菌快速鉴别.与多重PCR方法相比,该方法具有快速、高通量、重现性好等特点,可用于食品中单增李斯特菌血清型的快速鉴定.