质谱方法实现抗体类药物糖链修饰的鉴定与定量研究

• 作者: 应万涛 李晓宇 田芳 钱小红 黄怡
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 超高效液相荧光检测 液质联用 抗体药物 完整糖肽定量
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 32-41
• 页数: 10页
• 分类号: Q816
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20180104

摘要

目的:基于液质联用的串联质谱技术,建立基于完整糖肽水平的抗体药糖型定性定量分析方法,并用于生物仿制药糖型研究.方法:基于液相色谱质谱技术,从完整糖肽水平对糖型进行定性定量分析,同时与传统超高效液相荧光检测(ultra performance liquid chromatography_fluorescence detection,UPLC-FLR)结果比较,获得最优分析策略,并用于曲妥珠单抗仿制药批次间糖型定性定量分析.结果:UPLC-FLR方法定量分析了贝伐单抗7种糖型;液质联用方法定量19种糖型;经亲水相互作用色谱(hydrophilic interaction liquid chromatography,HIHC)富集后,定量22种糖型.曲妥珠单抗仿制药批次间糖型定量结果显示良好的一致性.结论:基于液质联用的方法,具有速度快、灵敏度高、检测糖型种类多等优势,有望作为一种稳定的抗体药物糖蛋白位点特异性定量分析策略.