硫氧还蛋白-2在氧化损伤的人晶状体上皮细胞中的表达及其意义

• 作者: 李迪 赵清侠 车选义
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: 硫氧还蛋白-2 H2O2 晶状体上皮细胞 氧化损伤
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 253-259
• 页数: 7页
• 字数: 4664字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2018.03.004

摘要

目的:探讨硫氧还蛋白-2(thioredoin-2,Trx-2)是否参与白内障的发病过程及其对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的影响.方法:选取志愿者(因外伤行透明晶状体取出术患者)10例和行超声乳化白内障手术患者(年龄大于60岁)30例的晶状体前囊膜,采用链霉素亲生物素蛋白-过氧化物酶标免疫组织化学法检测志愿者和白内障患者晶状体上皮细胞中Trx-2蛋白的表达情况.体外培养SRA01/04细胞,根据不同处理分为空白对照组、20μmol/L H2O2组、50 μmol/L H2O2组、100 μmol/L H2O2组、阴性对照组(转染对照空pCMV6质粒并用100μmol/LH2O2处理)和过表达Trx-2组(转染pCMV6-Trx-2过表达质粒并用100μmol/L H2O2处理).采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法检测各组细胞活力;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡;采用化学比色法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用Western印迹检测各组细胞中Trx-2以及B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(B-cell lymphoma 2 protein,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,caspase-3)的表达.结果:与志愿者相比,白内障患者晶状体上皮细胞中Trx-2蛋白表达明显减少(P＜0.05).与空白对照组比较,20,50,100μmol/L H202组Trx-2蛋白表达量均明显降低(均P＜0.05).与空白对照组相比,100μmol/LH2O2组和阴性对照组细胞存活率降低、凋亡率增加,细胞内SOD和CAT活性降低、GSH含量减少、MDA含量增加,Trx-2和Bcl-2蛋白表达降低,Bax和caspase-3蛋白表达增加(均P＜0.05).与阴性对照组比较,过表达Trx-2组细胞存活率增加、凋亡率降低,SOD和CAT活性增加、GSH含量升高、MDA含量降低,Trx-2和Bcl-2蛋白表达增加,Bax和caspase-3蛋白表达减少(均P＜0.05).结论:Trx-2参与白内障发病中上皮细胞的凋亡,过表达Trx-2能够减少H2O2诱导的细胞凋亡,这可能与拮抗H2O2诱导的氧化损伤有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵清侠	陕西省人民医院西安医学院附属医院手术室二部	28	66	5.0	6.0
2	车选义	陕西省人民医院西安医学院附属医院眼科	17	60	4.0	7.0
3	李迪	陕西省人民医院西安医学院附属医院眼科	7	4	1.0	2.0