沉默鸡B-Fα基因对IL-2、IL-4和IL-6转录水平的影响

• 作者: 余为一 刘雪兰 李娟 李锦春 陈芳芳
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 基因沉默 包装病毒 鸡MHCⅠ类分子基因(B-Fα) 白介素基因
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1747-1753
• 页数: 7页
• 分类号: S852.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.10.012

摘要

主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)和白介素(interleukin,IL)都是重要的免疫分子,其中MHCⅠ类分子递呈内源性抗原并启动细胞免疫,IL则是重要的免疫调节因子.关于鸡(Gallus gallus) MHCⅠ类分子(又称为B-Fα)与下游调节因子IL基因的关系尚不明确.本研究旨在应用基因沉默法研究下调B-Fα基因表达对IL-2、IL-4、IL-6转录水平的影响.首先构建沉默鸡B-Fα基因的重组慢病毒载体.根据B-Fα基因和短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)序列的结构要求,筛选3段DNA序列并设计合成shRNA;利用限制性内切酶定向插入慢病毒表达质粒pLL3.7,获得重组质粒.分别将3个重组质粒转染293T细胞,均能表达标签蛋白并包装慢病毒.将3株重组病毒感染HD-11细胞,感染效率达95％以上.利用qRT-PCR进行检测分析显示,重组病毒干扰B-Fα基因表达,分别下调至39％、97％和61％.将其中干扰效果最佳的重组慢病毒(pLL-shB-Fα-257)感染鸡源巨噬细胞系HD-11细胞,并检测IL-2、IL-4和IL-6的转录水平.结果显示,B-Fα基因表达下调的同时,IL基因转录水平受到不同程度的影响,其中IL-2表达下调(P＜0.01),IL-4上调(P＜0.05),IL-6没有明显变化.上述结果提示,应用基因沉默法可抑制B-Fα基因表达,并影响IL基因的转录水平,提示启动细胞免疫的B-Fα基因与下游调节免疫反应的细胞因子之间存在关联.本研究为深入探讨免疫反应的调控机理提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李锦春	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	46	161	8.0	10.0
2	余为一	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	121	1025	17.0	25.0
3	刘雪兰	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	35	167	7.0	12.0
4	李娟	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	34	202	8.0	13.0
5	陈芳芳	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	26	108	6.0	9.0