优化硝酸银染色在心肌线粒体蛋白双向电泳后凝胶染色中的应用

• 作者: 刘云 喻守佳 喻田 李科 王海英 魏义勇
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 硝酸银染色 线粒体 蛋白组学 双向电泳
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1554-1558
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2018.09.0350

摘要

蛋白组学研究中双向电泳(2-DE)后的SDS-PAGE凝胶染色存在灵敏度和质谱兼容性问题.线粒体中存在大量微量蛋白,对于这类亚细胞器蛋白质2-DE后的凝胶染色,这两种特性显得尤为重要.经典的硝酸银染色虽灵敏度高,但之后的质谱鉴定兼容性欠佳.因此,该研究通过优化硝酸银染色方法观察大鼠心肌线粒体蛋白质2-DE后的凝胶染色效果,挖取部分蛋白质斑点酶解后行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定,验证优化硝酸银染色与质谱鉴定的兼容性.结果表明,优化后的硝酸银染色方法灵敏度高,与MALDI-TOF-MS兼容性好,是一种线粒体蛋白质2-DE后染色的理想方法.