重组SIRPα1的体外表达及其在红细胞CD47-SIRPα信号通路研究中的应用

• 作者: 叶璐夷 向东 夏荣伟 张嘉敏 朱自严 李勤 杨启修 王晨 荀春志 赵俸涌
• 来源期刊: 中国输血杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 信号调节蛋白α1(SIRPα1) 重组蛋白 CD47-SIRPα信号通路 体外表达 红细胞结合试验
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学与实验研究
• 页码范围: 934-937
• 页数: 4页
• 分类号: R446.62|Q511
• 语种: 中文
• DOI: 10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2018.09.004

摘要

目的 获得野生型信号调节蛋白α1(SIRPα1)功能结构域重组蛋白,以用于研究正常或异常红细胞的吞噬和清除中CD47-SIRPα信号通路的作用.方法 全基因合成人源野生型SIRPα1 IgV结构域编码区;将合成片段构建入携带组氨酸(His)标签的pET-21a大肠杆菌载体,获得重组表达载体.使用大肠杆菌BL21 (DE3)细胞体外表达重组SIRPα1,并通过亲和层析法纯化;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定重组SIRPα1;采用基于ELISA的红细胞结合试验评估2名Rh缺失表型献血者与正常Rh表型个体对照在红细胞结合水平的差异;流式细胞术检测红细胞CD47表达;采用单因素方差分析对数据做统计分析.结果 成功构建重组表达载体,纯化获得野生型重组SIRPα1.成功建立了基于ELISA的红细胞结合试验方法并应用于评估重组SIRPα1与红细胞的结合.伴随CD47表达量的明显降低,Rh缺失表型个体的红细胞和正常个体相比,其与重组SIRPα1的结合能力下降.结论 CD47-SIRPα信号通路可能在Rh缺失表型红细胞的清除中发挥了作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	向东		81	844	15.0	26.0
2	张嘉敏		23	146	5.0	11.0
3	王晨		17	119	6.0	10.0
4	朱自严		81	565	14.0	21.0
5	杨启修		9	8	2.0	2.0
6	李勤		24	41	3.0	5.0
7	赵俸涌		11	6	2.0	2.0
8	叶璐夷		11	65	3.0	8.0
9	夏荣伟	曲靖市中心血站	1	0	0.0	0.0
10	荀春志	曲靖市中心血站	1	0	0.0	0.0