线粒体DNA参与蓝光诱导视网膜色素上皮细胞损伤的机制

• 作者: 俞永珍 周文杰 徐哲 李丹丹 邹玉平 邹秀兰
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 线粒体DNA 凋亡 氧化应激 人视网膜色素上皮细胞
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 267-272
• 页数: 6页
• 字数: 5134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2018.04.008

摘要

目的 研究线粒体DNA参与蓝光诱导体外培养的人视网膜色素上皮(hRPE)细胞凋亡的作用机制及与时间的关系.方法 用发光二极管(LED)蓝光光源造成蓝光损伤体外培养的hRPE细胞模型,蓝光辐照度为(4.0±0.5)mW/cm2,并将细胞分为光照0(正常对照组)、0.5、l、2、4、6、12和24 h处理组.免疫荧光染色鉴定人原代hRPE细胞;Western blot法检测caspase-3、cleaved caspase-3、caspase-9、cleaved caspase-9、bax和bcl-2蛋白的表达情况;实时荧光PCR检测线粒体DNA拷贝数;普通PCR检测线粒体DNA 4977bp缺失.结果 分离的细胞呈长梭形、三角形或不规则形,RPE65特异地表达在细胞质中.凋亡蛋白bax从光照后1h显著上调;cleaved caspase-3从光照后2h开始表达水平均显著高于正常对照组;caspase-3、caspase-9和cleavedcaspase-9从光照后4h开始表达水平均显著高于正常对照组;bcl-2从光照后2h开始表达水平均较正常对照组下调,与正常对照组比较凋亡相关蛋白的表达差异均有统计学意义(均P＜0.05).实时荧光PCR检测正常对照组线粒体DNA拷贝数较光照0.5、1、2、4、6、12和24 h处理组降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).普通PCR检测光照0.5、1、2、4、6、12和24 h处理组线粒体DNA 4977bp缺失表达水平高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 蓝光可导致线粒体DNA损伤,进而激活细胞凋亡系统,尤其是线粒体凋亡通路,导致细胞损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹玉平	广州军区广州总医院眼科	31	111	6.0	8.0
2	邹秀兰	广州军区广州总医院眼科	25	69	5.0	6.0
3	徐哲	广州军区广州总医院眼科	11	38	4.0	5.0
4	俞永珍	广州军区广州总医院眼科	5	6	1.0	2.0
5	李丹丹	510405 广州中医药大学研究生院	1	1	1.0	1.0