LC-MS/MS法测定细胞悬液中罗丹明123的浓度

• 作者: 常媛媛 张佳丽 田鑫 魏涵 魏静瑶
• 来源期刊: 中国临床药理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 罗丹明123 液质联用法 MDCK-Pgp细胞 P-糖蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究方法
• 页码范围: 979-982,1004
• 页数: 5页
• 分类号: R97
• 字数: 3499字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13699/j.cnki.1001-6821.2018.08.018

摘要

目的 建立一种测定MDCK-Pgp细胞中罗丹明123(R123)浓度的液质联用(LC-MS/MS)法.方法 用罗丹明6G(R6G)作为内标,乙腈沉淀法进行蛋白沉淀.色谱柱:Kinetex C18柱(2.1 mm×75 mm,2.6 μm),柱温:40 ℃,流动相:甲醇-0.1％甲酸水,梯度洗脱,流速:0.30 mL·min-1,进样量:1μL.用电喷雾离子源,正离子检测方式,多反应监测扫描方式进行监测.考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度和回收率、基质效应、稳定性.结果 R123的标准曲线方程为y =2.98 × 10-3x+2.66(r=0.998 5),在0.2～500.0ng·mL-1内线性关系良好,最低定量限为0.2ng·mL-1.日内与日间精密度均小于10％,提取回收率为97.60％ ～98.29％,基质效应为98.44％～99.40％,长期、短期及反复冻融稳定性良好.5 μmol·L-1环孢素给药后30 min和l,2,3h分别使MDCK-Pgp细胞内R123浓度增加约66％,153％,46％和25％.结论 该方法快速、灵敏、准确,适用于测定细胞的R123的浓度,可为细胞中P-gp活性和功能的评价提供便利且快捷的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田鑫	郑州大学第一附属医院药学部	49	135	7.0	9.0
2	魏涵	郑州大学第一附属医院药学部	4	2	1.0	1.0
3	常媛媛	郑州大学第一附属医院药学部	2	1	1.0	1.0
4	张佳丽	郑州大学第一附属医院药学部	3	4	1.0	1.0
5	魏静瑶	郑州大学第一附属医院药学部	1	1	1.0	1.0