家蝇抗菌肽MAF-1A的串联表达与抗白念珠菌体外活性检测

• 作者: 吴建伟 张迎春 朱志翠 王涛 马晓琳
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗菌肽 MAF-1A 串联表达 白念珠菌 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 429-433
• 页数: 5页
• 分类号: R384
• 字数: 3665字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.056

摘要

目的 构建家蝇抗菌肽MAF-1A基因原核串联表达体系,在大肠杆菌中表达具有抗菌活性的MAF-1A.方法 根据大肠杆菌密码子的偏嗜性进行密码子优化,设计并合成含有5个拷贝的MAF-1A串联基因序列;将合成的串联基因序列克隆到表达载体pET28a并转化大肠杆菌Roseeta(DE3),应用IPTG诱导表达5×MAF-1A串联重组蛋白;通过SDS-PAGE电泳、Western Blot对表达产物进行分析;用肠激酶专一性切割经Ni-NTA纯化后的5×MAF-1A重组串联蛋白,得到MAF-1A单体;采用微量稀释法检测MAF-1A单体对白念珠菌的体外抗菌活性.结果 5×MAF-1A蛋白在大肠杆菌中呈可溶性表达,28℃、0.8 mmol/L IPTG诱导12h可达最大表达量;酶切后的抗菌肽MAF-1A单体对白念珠菌的MIC和MBC分别为0.5 mg/mL、1.0 mg/mL.结论 成功构建MAF-1A原核串联表达系统,重组表达的MAF-1A对白念珠菌具有较高的抑杀活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴建伟	贵州医科大学基础医学院	13	22	4.0	4.0
2	王涛	贵州医科大学基础医学院	14	17	2.0	4.0
4	张迎春	贵州医科大学基础医学院	7	17	3.0	4.0
5	马晓琳	贵州医科大学基础医学院	1	1	1.0	1.0
9	朱志翠	贵州医科大学基础医学院	1	1	1.0	1.0