抑癌基因DKK3过表达抑制人皮肤黑素瘤细胞迁移和侵袭的机制探讨

• 作者: 余音 刁庆春 刘冬阳 刘素桃 张欣 李晶 王灿 金晶 陈静 黎智
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 黑色素瘤 基因,肿瘤抑制 细胞运动 细胞侵袭 DKK3 A375细胞
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 874-878
• 页数: 5页
• 字数: 2833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.12.005

摘要

目的 探讨DKK3在人皮肤恶性黑素瘤细胞及组织中的表达及转染DKK3对人黑素瘤细胞A375迁移与侵袭的影响.方法 通过Western印迹法分析DKK3在人黑素瘤细胞系(HM、A375、WM451、SK-MEL-1、Hs-695T、MDA-MB-435s、WM35)及色素痣细胞中的表达,实时荧光定量PCR检测2014年8月至2017年6月在重庆市中医院皮肤科收集的58例恶性黑素瘤(包括原发性黑素瘤与转移性黑素瘤)和30例色素痣组织中DKK3 mRNA的相对表达水平.分别转染pcDNA3.1(+)-Flag-Vector质粒(对照组)和pcDNA3.1 (+)-Flag-DKK3质粒(转染组)至恶性黑素瘤A375细胞中,通过实时荧光定量PCR和Western印迹法验证DKK3的过表达,及DKK3过表达对黑素瘤细胞迁移和侵袭相关的分子表达水平的影响;通过细胞平板划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验分析DKK3对A375细胞迁移及侵袭的影响.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,两独立样本间的比较采用t检验;多组数据的比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 DKK3蛋白在人黑素瘤细胞系中表达缺失或低表达,在色素痣组织中高表达.原发性黑素瘤、转移性黑素瘤与色素痣中DKK3 mRNA表达水平(2-ΔΔCt)分别为(0.325±0.150)×10-3、(0.142±0.210)×10-3、(0.634±0.120)×10-3,差异有统计学意义(F=46.57,P＜0.05),转移性黑素瘤表达水平低于原发性黑素瘤和色素痣(LSD-t分别为2.48、3.12,均P＜0.05).A375细胞转染DKK3后,细胞划痕迁移率(22.11％±5.1 1％)低于对照组(54.36％±23.22％)(t=2.36,P＜0.001);迁移及侵袭实验中,转染组穿出小室细胞数(265±33、76±18)低于对照组(429±41、135±21),差异有统计学意义(t值分别为1.24、1.35,均P＜ 0.001).转染组A375细胞过表达DKK3后,上皮钙黏着蛋白和mRNA表达上升,神经钙黏着蛋白、波形蛋白、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP7、MMP11蛋白和mRNA的表达下降.结论 DKK3在黑素瘤细胞系和组织中表达下调,DKK3过表达后A375细胞的迁移和侵袭受到明显抑制,DKK3可能是抑制皮肤恶性黑素瘤转移的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈静	重庆大学附属肿瘤医院重庆市肿瘤研究所重庆市肿瘤医院放疗科	38	263	10.0	14.0
2	张欣	重庆大学附属肿瘤医院重庆市肿瘤研究所重庆市肿瘤医院放疗科	17	94	6.0	9.0
3	刘冬阳	重庆市中医院皮肤科	5	2	1.0	1.0
4	刁庆春	重庆市中医院皮肤科	39	103	5.0	9.0
5	余音	重庆市中医院皮肤科	7	3	1.0	1.0
6	刘素桃	重庆市中医院皮肤科	5	3	1.0	1.0
7	李晶	重庆市中医院皮肤科	2	3	1.0	1.0
8	黎智	重庆市中医院皮肤科	2	3	1.0	1.0
9	金晶	湖北省荆门市第二人民医院手术室	1	0	0.0	0.0