MCMV诱导鼠T细胞淋巴瘤EL4细胞凋亡及其作用机制

• 作者: 刘林 夏瑜 张在利 朱艳 李莎 杜鹃 王利 罗小华 肖青
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: T细胞淋巴瘤 小鼠巨细胞病毒 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 淋巴瘤基础与临床
• 页码范围: 1093-1100
• 页数: 8页
• 分类号: R733.1
• 字数: 5016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7534/j.issn.1009-2137.2018.04.025

摘要

目的:观察鼠T细胞淋巴瘤细胞株EL4细胞能否被小鼠巨细胞病毒(Murine cytomegalovirus,MCMV)感染及其感染前后对EL4细胞形态的变化及凋亡的影响.方法:分别以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1、10、100的MCMV smith株感染EL4细胞,于感染后1、3和5d收集细胞;设立正常对照组、MOI=1感染组、MOI=10感染组、MOI=100感染组;另外设有更昔洛韦(ganciclovir,GCV)组、MCMV+ GCV组.应用瑞氏-姬姆萨染色后光学显微镜下观察细胞形态,台盼蓝抗染法计数细胞存活率,实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测感染细胞内MCMV DNA基因拷贝数,流式细胞技术检测细胞凋亡,RT-qPCR检测感染细胞P53、P21、cFlip、Caspase8的mRNA表达水平,Western blot检测Caspase8、P53、BAX、BCL-2、Cleaved-Caspase3的蛋白表达水平.结果:瑞氏-姬姆萨染色后光学显微镜下可见被MCMV感染的EL4细胞体积增大,细胞核不规则并见折叠扭曲.与正常对照组相比,随着感染复数的增加以及感染时间的延长,各感染组EL4细胞存活率降低,凋亡率增加(P＜0.05),并均可上调凋亡蛋白P53、BAX/BCL-2、Cleaved-caspase3和Caspase8表达;且细胞存活率下降、凋亡率升高及各凋亡蛋白上调均以MOI=10感染ELA细胞后d5最为明显.与MCMV感染组(MOI =60)比较,MCMV+ GGV组(MOI=60,GCV 25μg/ml)EL4细胞内MCMV DNA含量降低(P＜0.05),EL4细胞凋亡率及凋亡蛋白P53、Caspase8、BAX/BCL-2表达降低(P＜0.05);与正常对照组比较,GCV组EL4细胞凋亡率及凋亡蛋白P53、Caspase8、BAX/BCL-2的表达无明显差异.结论:鼠T细胞淋巴瘤细胞株EL4细胞可被MCMV感染,呈现出明显凋亡现象.EL4细胞在MCMV感染后凋亡蛋白P53、BAX/BCL-2、Cleaved-caspase3、Caspase8表达上调.更昔洛韦抑制感染的EL4细胞内MCMV DNA复制并减弱MCMV对EL4细胞的杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜鹃	重庆医科大学附属第一医院血液科	5	15	3.0	3.0
2	刘林	重庆医科大学附属第一医院血液科	96	300	8.0	14.0
3	王利	重庆医科大学附属第一医院血液科	68	142	7.0	9.0
4	肖青	重庆医科大学附属第一医院血液科	62	161	6.0	10.0
5	罗小华	重庆医科大学附属第一医院血液科	14	20	3.0	4.0
6	李莎	重庆医科大学附属第一医院血液科	8	6	1.0	2.0
7	朱艳	陆军军医大学西南医院血液科	2	0	0.0	0.0
8	张在利	重庆医科大学附属第一医院血液科	1	0	0.0	0.0
9	夏瑜	重庆医科大学附属第一医院血液科	1	0	0.0	0.0