甲亢宁胶囊含药血清对M22刺激FRTL-5细胞增殖的影响及自噬在其中的作用

• 作者: 李敏 柏力萄 王秋虹 郑慧娟 陈舒雅 魏军平 魏璠
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 甲亢宁胶囊 Graves病 M22 FRTL-5细胞 细胞自噬 自噬相关蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1222-1228
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20180630.246

摘要

目的 探讨甲亢宁胶囊含药血清对甲状腺刺激性抗体(TSAb)单克隆抗体M22刺激Fisher大鼠甲状腺细胞系(FRTL-5)增殖作用和自噬的影响.方法 体外培养FRTL-5细胞,采用不同浓度及时间观察M22刺激细胞增殖的量效关系,并确定作用最佳浓度及时间并制备甲亢宁胶囊含药血清.将FRTL-5细胞分为模型组(M22刺激24 h+15％空白大鼠血清),中药低、中、高剂量组(M22刺激24 h后5％、10％、15％甲亢宁胶囊含药血清干预24 h),正常组(15％空白大鼠血清).采用CCK8法、酶联免疫竞争法检测各组细胞增殖情况及上清液中cAMP水平.确定高剂量(15％)甲亢宁胶囊含药血清抑制细胞增殖作用最强后再将FRTL-5细胞分为正常组(15％空白大鼠血清)、模型组(M22刺激24 h+15％空白大鼠血清)和中药组(M22刺激24 h后15％甲亢宁胶囊合药血清干预24 h),透射电镜下观察各组细胞内自噬体的变化,Western blot检测各组细胞自噬相关LC3及Beclin1蛋白水平.结果 M22对FRTL-5细胞的增殖影响呈现明显量效关系,确定1 μg/mL M22于24 h增殖作用最佳.与正常组比较,模型组FRTL-5细胞增殖活性明显增强(P＜0.01),细胞上清液中cAMP释放量增加(P＜0.01),自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达减少(P＜0.01);与模型组比较,中药中剂量组和高剂量组FRTL-5细胞增殖被抑制(P＜0.01),上清液中cAMP释放量减少(P ＜0.05,P＜0.01),中药低剂量组作用差异无统计学意义(P＞0.05),中药组自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达均增高(P＜0.01).透射电镜提示,模型组较正常组自噬小体的数量减少,而中药组较模型组增多.结论 M22可促进FRTL-5细胞增殖且导致细胞自噬异常,而中药甲亢宁胶囊可通过改善其自噬异常,进而发挥抑制FRTL-5细胞增殖的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李敏		77	652	14.0	23.0
2	魏军平		133	646	13.0	20.0
3	王秋虹		28	209	9.0	14.0
4	魏璠		16	60	4.0	7.0
5	柏力萄		21	38	3.0	5.0
6	郑慧娟		16	81	5.0	8.0
7	陈舒雅		7	30	3.0	5.0