miR-3-5p通过VPS53介导的自噬对结直肠癌细胞增殖的影响

• 作者: 黎爽 彭洪 龚磊 唐军伟 吴洪 黄梅
• 来源期刊: 结直肠肛门外科
• 学科: 医学
• 关键词: 结直肠癌细胞 miR-31-5p VPS53 Beclin1 自噬
• 年，卷（期）: 2022,（5）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 453-459
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19668/j.cnki.issn1674-0491.2021.05.009

摘要

目的 探讨miR-31-5p通过VPS53介导的自噬对结直肠癌细胞增殖的影响。方法 选择人正常结直肠黏膜细胞（FHC）及结直肠癌细胞株HT29、HCT116、SW480、LoVo进行研究。采用实时荧光定量PCR实验检测miR-31-5p在前述各种细胞中的表达，miR-31-5p对VPS53 RNA表达的影响，miR-31-5p、VPS53对Beclin1 RNA表达的影响。采用CCK-8法检测细胞活力。利用数据库Targetscan筛选与miR-31-5p靶向结合的靶基因，并通过双荧光素酶报告实验进行验证。利用数据库GEPIA分析VPS53和Beclin1表达的相关性。采用透射电子显微镜实验探究VPS53对细胞自噬的影响。采用蛋白免疫印迹实验（Western blot）分析VPS53对Beclin1蛋白表达的影响。结果 与FHC细胞相比，HCT116、LoVo、HT29、SW480细胞的miR-31-5p表达水平均升高（均P<0.05）。过表达miR-31-5p可促进LoVo细胞增殖（P<0.05）。miR-31-5p与VPS53靶向结合。过表达miR-31-5p可下调VPS53的RNA表达水平（P<0.05）。过表达VPS53可抑制LoVo细胞增殖，可逆转过表达miR-31-5p对LoVo细胞增殖的促进作用（均P<0.05）。结直肠癌组织中的VPS53与Beclin1的表达呈正相关。过表达VPS53促进自噬小体的形成。过表达VPS53可上调Beclin1蛋白的表达水平（P<0.05）。自噬抑制剂可逆转过表达VPS53对LoVo细胞增殖的抑制作用（P<0.05）。过表达miR-31-5p可下调Beclin1的RNA表达水平，过表达VPS53可逆转该现象（均P<0.05）。结论miR-31-5p是结直肠癌发生发展中的重要调控因子，miR-31-5p在结直肠癌细胞中高表达。miR-31-5p可能通过下调VPS53来抑制Beclin1的表达，通过抑制自噬来促进结直肠癌细胞的增殖。