牛病毒性腹泻病毒纳米抗体文库构建与筛选

• 作者: 丁金花 吴鹏 李启峰 盛金良 肖盛中 肖红冉 陈创夫 马旭升
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒E0 纳米抗体 生物淘选 噬菌体展示技术
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 6-12
• 页数: 7页
• 分类号: S852.653
• 字数: 6109字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2018.05.002

摘要

旨在获得牛病毒性腹泻病毒(BVDV)特异性纳米抗体.通过用BVDV-E0重组蛋白对羊驼进行免疫,分离血液中的淋巴细胞.利用噬菌体展示技术,构建噬菌体展示文库,经过连续3次生物淘筛获得与BVDV-E0蛋白结合的噬菌体,对所得VHH序列进行测序和基因比对.用ELISA筛选出抗BVDV-E0的高亲和力纳米抗体,并验证纳米抗体的亲和力和活性.结果成功构建了插入率为86％、库容量为1.3×1011 cfu的噬菌体表达文库,经过筛选获得5个BVDV-E0阳性单克隆,将这些基因克隆至原核表达体系,表达和纯化后获得了高纯度的BVDV-E0纳米抗体,经亲和力的鉴定获得2个不同的高亲和力的VHH基因,并且能结合人工抗原E0,还能够被竞争抗体所阻断.研究结果为用于组装检测BVDV试剂盒和研制BVDV疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盛金良	石河子大学动物科技学院	40	223	6.0	14.0
2	陈创夫	石河子大学动物科技学院	192	732	14.0	17.0
3	吴鹏	石河子大学动物科技学院	16	35	2.0	5.0
4	肖红冉	石河子大学动物科技学院	6	18	3.0	4.0
5	肖盛中	石河子大学动物科技学院	10	6	2.0	2.0
6	丁金花	石河子大学动物科技学院	4	4	1.0	1.0
7	马旭升	石河子大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
8	李启峰		2	0	0.0	0.0