吡咯烷二硫代氨基甲酸酯在二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠中的作用及机制

• 作者: 宋新文 李伟伟 申保生 高海丽
• 来源期刊: 中华实用诊断与治疗杂志
• 关键词: 肝纤维化 吡咯烷二硫代氨基甲酸酯 核转录因子-κB 转化生长因子-β1 Ⅲ型胶原 大鼠
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13507/j.issn.1674-3474.2018.01.002

摘要

目的 观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导肝纤维化大鼠肝组织核转录因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,Col-Ⅲ)表达的影响,探讨PDTC抗肝纤维化的可能机制.方法 22只SD大鼠随机分为对照组6只,模型组8只和治疗组8只.模型组和治疗组腹腔注射质量分数0.5％ DMN溶液2 mL/kg,每2d注射1次,连续4周,诱导大鼠肝纤维化模型;对照组腹腔注射等量生理盐水.治疗组造模期间给予PDTC溶液150 mg/(kg·d)灌胃,对照组、模型组给予等量蒸馏水灌胃.实验结束后处死大鼠,取肝左叶组织光镜下观察肝组织病理改变,采用电泳迁移率试验检测肝组织NF-κBp65活性,实时荧光定量PCR法检测肝组织NF-κBp65、TGF-β1和Col-ⅢmRNA表达,免疫组织化学法检测肝组织NF-κBp65着色细胞数目和Col-Ⅲ着色面积.结果 对照组肝小叶结构正常,细胞排列规律,未见肝细胞变性、坏死;模型组肝细胞融合性坏死,胶原纤维明显增生,假小叶形成;治疗组肝细胞肿胀、变性及炎症细胞浸润程度均较模型组轻;模型组、治疗组肝组织NF-κBp65活性[(76.6±6.5)％、(51.2±4.6)％],NF-κBp65 mRNA(0.019 3±0.005 0、0.009 5±0.002 1)、TGF-β1 mRNA(0.017 5±0.001 2、0.009 7±0.001 1)及Col-ⅢmRNA表达(0.077 5±0.030 5、0.030 1±0.003 3)均高于对照组((28.5±3.3)％、0.003 0±0.001 4、0.004 7±0.000 9、0.015 2±0.005 5)(P＜0.05),NF-κBp65着色细胞数目[(68.60±4.65)、(49.65±3.60)个]均较对照组[(14.68±2.98)个]多(P＜0.05),Col-Ⅲ着色面积[(10.39±1.53)、(7.36±1.17)μm2]均较对照组[(2.46±0.31)μm2]大(P＜0.05);模型组肝组织NF-κBp65活性,NF-κBp65 mRNA、TGF-β1mRNA及Col-ⅢmRNA表达均较治疗组高,NF-κBp65着色细胞数目较治疗组多,Col-Ⅲ着色面积较治疗组大(P＜0.05);Pearson相关分析结果显示,肝组织NF-κBp65活性与NF-κBp65 mRNA、TGF-β1 mRNA、Col-ⅢmRNA表达,NF-κBp65着色细胞数目,Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.884,P＜0.001;r=0.976,P＜0.001;r=0.769,P＜0.001;r=0.934,P＜0.001;r=0.942,P＜0.001),TGF-β1 mRNA与Col-ⅢmRNA表达及Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.831,P＜0.001;r=0.918,P＜0.001).结论 PDTC可能通过抑制NF-κB活性,下调TGF-β1表达,抑制以ColⅢ为主要成分的细胞外基质过度沉积,来发挥抗肝纤维化作用.