REST/CoREST对TBI后皮层神经元轴突修复作用的体外研究

• 作者: 何军 刘洁 叶玉勤 杨永祥 蒯建科 贺晓生
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 创伤性脑损伤 氧糖剥夺 抑制元素-1沉默转录因子 REST辅助抑制因子
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 897-904
• 页数: 8页
• 分类号: R651.1+5
• 字数: 5852字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2018.09.006

摘要

目的 探讨抑制元素-1沉默转录因子(REST)、REST辅助抑制因子(CoREST)对创伤性脑损伤(TBI)后皮层神经元轴突再生及修复的影响. 方法 (1)体外原代培养C57BL/6胎鼠大脑皮层神经元,实时定量PCR(q-PCR)检测神经元培养1d、3d、5d、7d、9d、11d后微小RNA-124(miR-124)的表达;(2)将培养5d后神经元分为miR-124模拟物组、空白对照组、miR-124抑制物组,分别转染miR-124模拟物、无义对照序列、miR-124抑制物.转染后0h、6h、12h、24 h、48 h、72 h采用q-PCR检测神经元miR-124的表达;(3)将培养7d后神经元分为空白对照组、氧糖剥夺(OGD)模型组、上调miR-124+OGD模型组、下调miR-124+OGD模型组,后2组细胞分别转染miR-124模拟物和miR-124抑制物.转染48 h后3组细胞均制备OGD模型,q-PCR检测OGD处理后0h、6h、12 h、24 h、48 h、72 h各组神经元miR-124的表达;Western blotting检测OGD处理后48 h神经元生长相关蛋白43 (GAP-43)、REST、CoREST的表达;免疫荧光染色检测OGD处理后48 h神经元REST、CoREST的表达. 结果 (1)皮层神经元培养1、3、5、7d后miR-124的表达逐渐增高,皮层神经元培养7、9、11d后miR-124的表达逐渐降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);(2)转染后24、48h miR-124抑制物组神经元miR-124的表达低于空白对照组.转染后12h、24 h、48 h、72 h miR-124模拟物组神经元miR-124的表达高于空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).其中转染后48 h神经元miR-124的表达最高.(3)q-PCR检测显示,OGD处理后12 h、24 h、48 h、72 h OGD模型组神经元miR-124的表达高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),其中OGD处理后48 h最高;OGD处理后0h、6h、12h、24 h、48 h、72 h,上调miR-124+OGD模型组神经元miR-124的表达高于空白对照组和OGD模型组,差异有统计学意义(P＜0.05),其中OGD处理后48 h最高;Western blotting检测显示空白对照组,OGD模型组、下调miR-124+OGD模型组皮层神经元GAP-43、CoREST的表达依次增高,REST的表达依次降低,差异有统计学意义(P＜0.05).上调miR-124+OGD模型组神经元GAP-43、CoREST的表达低于OGD模型组,REST的表达高于OGD模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光染色检测结果与Western blotting检测结果一致. 结论 REST、CoREST作为一对调节子,可能是TBI后神经元轴突修复及再生的关键因素.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨永祥	空军军医大学西京医院神经外科	9	17	3.0	3.0
2	贺晓生	空军军医大学西京医院神经外科	15	14	2.0	3.0
3	蒯建科	西安市第三医院麻醉科	8	11	2.0	3.0
4	叶玉勤	空军军医大学西京医院神经外科	9	15	3.0	3.0
5	刘洁	空军军医大学唐都医院风湿免疫科	5	0	0.0	0.0
6	何军	西安市第三医院麻醉科	1	0	0.0	0.0