小鼠骨髓源性树突细胞的体外优化培养及其生物学特性鉴定

• 作者: 于雪 任虹 刘敏 张兰兰 胡京红 范盎然 闫军堂
• 来源期刊: 世界中西医结合杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树突细胞 体外优化 生物学特性
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 482-486
• 页数: 5页
• 分类号: R285.5
• 字数: 4014字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13935/j.cnki.sjzx.180410

摘要

目的 对小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)的体外培养方法进行优化.方法 从小鼠获取骨髓细胞,用含因子的完全培养基于37 ℃5% CO2培养箱中培养,3 h后弃去上清,加入相同因子浓度的完全培养基继续培养,48 h收集上清细胞离心后种于6孔板中以上培养基继续培养,96 h后换液处理,第8天时添加LPS刺激作为LPS刺激组,未添加LPS作为对照组,结合流式细胞仪(FCM)、酶联免疫吸附技术(ELISA)等从细胞形态、表面分子[B7-2分子(CD86)]及主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的特异性表达、相关因子[白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-10(IL-10)]分泌及诱导T淋巴细胞的增殖能力等进行鉴定.结果 镜下观察细胞有明显的不规则枝状突起,有典型DCs形态特征.流式结果显示细胞纯度为77.4%左右;经LPS刺激后树突细胞CD86、MHCⅡ的比例均明显增加(P<0.001);ELISA结果显示与对照组相比,LPS刺激组IL-12、IL-10的含量明显增加(P<0.01),IL-12的表达量增加约18倍,IL-10的表达量增加约2倍.MLR混合淋巴细胞反应结果显示经LPS刺激后LPS刺激组细胞诱导T淋巴增殖能力显著增强(P<0.05).结论 树突细胞体外原代培养48 h后,选用上清细胞继续培养可以获得纯度较高性能较好的DCs.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫军堂	北京中医药大学中医学院	81	289	11.0	14.0
2	刘敏	北京中医药大学中医学院	126	752	15.0	21.0
3	胡京红	北京中医药大学中医学院	47	603	11.0	24.0
4	范盎然	北京中医药大学中医学院	27	76	4.0	7.0
5	于雪	北京中医药大学中医学院	38	64	4.0	6.0
6	张兰兰	北京中医药大学中医学院	5	9	2.0	3.0
7	任虹	北京中医药大学中医学院	4	4	2.0	2.0