黄孢原毛平革菌漆酶基因lac1680的克隆、表达及产酶研究

• 作者: 刘梁涛 曹香林 陈建军
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 黄孢原毛平革菌 漆酶基因 异源表达 蛋白纯化 酶活力
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 214-220
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0946

摘要

以先前筛选到的高产漆酶黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)为模板,利用同源克隆技术合成一个全长为1680 bp的漆酶基因,核苷酸及氨基酸序列比对显示该基因与真菌漆酶基因有较高的同源性,将其命名为lac1680,将该基因连接到构建好的pET24a载体上,并转入表达菌株BL21 Escherichia coli(DE3)中,经对重组菌预表达的全菌裂解物进行SDS-PAGE检测,获得75 kD目的条带,表明诱导表达成功.随后利用NI-NTA层析柱对洗脱下来的lac1680蛋白进行纯化,纯化回收后,漆酶纯度可达98％ 以上.通过对比基因工程菌和黄孢原毛平革菌野生菌株不同培养时间产酶活力,结果表明构建好的工程菌活力比原菌酶活力有明显的提高,提高了近39％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈建军	河南师范大学生命科学学院	42	287	10.0	14.0
2	曹香林	河南师范大学水产学院	26	311	8.0	17.0
3	刘梁涛	河南师范大学生命科学学院	3	7	1.0	2.0