低氧环境下黄芪甲苷促进人骨髓间充质干细胞分泌血管内皮细胞相关因子的实验研究

• 作者: 李金娟 王秋萍 胡继宏 贾佳 赵翊 赵静苗 路娟 金华 靳利梅
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 血管内皮生长因子 黄芪甲苷 低氧 骨髓间充质干细胞 内皮素 前列环素 内皮型一氧化氮合酶
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 693-698
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20180308.113

摘要

目的 观察在低氧环境下,黄芪甲苷能否诱导人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向血管内皮样细胞分化,提高BMSCs经血管内皮生长因子(VEGF)诱导分化后的血管内皮样细胞的功能.方法 将人BMSCs分为4组:对照组(单纯人BMSCs培养)、VEGF组(含VEGF载体的腺病毒的完全培养基加入人BMSCs)、黄芪甲苷组(含黄芪甲苷粉剂加入人BMSCs)和联合诱导组(含黄芪甲苷粉剂和VEGF载体的腺病毒的完全培养基加入人BMSCs),5％ O2干预2周,对分化的细胞进行形态学观察,流式细胞仪检测细胞表型CD31和CD105的表达,ELISA检测细胞培养上清液中VEGF及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)因子的含量,Real-time PCR和Western blot检测内皮素(ET)和前列环素(PGI)的表达.结果 (1)2周后,镜下观察对照组与黄芪甲苷组细胞形态无明显变化,VEGF组和联合诱导组细胞似铺路石子样生长.(2)流式结果显示,对照组与黄芪甲苷组细胞不表达CD31,高表达CD105;VEGF组和联合诱导组细胞高表达CD31,低表达CD105,且VEGF组CD31表达高于联合诱导组(P＜0.05),而CD105低于联合诱导组(P＜0.05).(3) ELISA检测发现,与对照组比较,各干预组的VEGF及eNOS因子表达均增高(均P＜0.05),且大小顺序为VEGF组＞联合诱导组＞黄芪甲苷组.(4) RT-PCR及Western blot检测发现,与对照组比较,各干预组ET水平均升高(P＜0.05),PGI表达量均降低(P＜0.05);且联合诱导组ET蛋白表达水平最高,VEGF组PGI表达量最低.结论 在低氧环境下,黄芪甲苷促进人BMSCs分泌VEGF相关因子;黄芪甲苷联合VEGF可以促进VEGF诱导分化后的血管内皮样细胞分泌ET.