苹果腐烂病菌VmHMG基因敲除突变体获得及表型分析

• 作者: 何邦令 刘会香 孙庚午 王怡霖 王玉涛 葛顺峰 贾晓曼
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 苹果腐烂病菌 VmHMG 同源重组 融合PCR 致病性
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 448-454
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2018.03.0448

摘要

苹果腐烂病菌是引起我国苹果腐烂病的主要病原真菌,对苹果产业造成了严重的经济损失.为有效控制病害的发生,本试验研究了VmHMG对苹果腐烂病菌的生长发育及致病性的影响.本研究通过融合PCR技术将苹果腐烂病菌HMG-box基因上下游片段与及潮霉素筛选标记基因Hpt片段,构建敲除载体,利用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化,再经潮霉素初筛、PCR扩增和Southern杂交验证,最终从95个转化子中得到2株敲除突变体△1-5、△2-22,敲除效率为2.1％.与野生菌株相比,△1-5、△2-22在菌落颜色、子实体产生等方面没有发生明显变化;突变株平均生长速率分别下降了10.8％和19.8％,但致病性分别增加了48.5％和56.2％.由此可知,VmHMG基因缺失抑制了苹果腐烂病菌的生长,增强了其致病性,对其他性状影响不明显.本研究通过获得VmHMG基因敲除突变体,初步分析了该基因的功能,为明确病菌的生长发育及致病作用机制奠定了理论基础.