miR-145-3p通过下调CDK1抑制骨肉瘤MG-63细胞系的增殖、侵袭与凋亡

• 作者: 代国 余铃 孙祥然 郭卫春
• 来源期刊: 临床和实验医学杂志
• 关键词: 骨肉瘤 miR-145-3p 周期素依赖性蛋白激酶1 增殖 侵袭 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（21）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2241-2245
• 页数: 5页
• 字数: 4526字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4695.2018.21.001

摘要

目的 研究mircoRNA-145-3p(miR-145-3p)对骨肉瘤细胞系MG-63细胞的增殖、侵袭与凋亡的调控作用.方法 通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别测定miR145-3p在MG-63细胞与人成骨细胞系hFOB1. 19细胞中的表达水平.将MG-63分成实验组和对照组,通过人工合成miR145-3p-mimic(miR-145-3p类似物),使用慢病毒载体将miR-145-3p-mimics转入实验组MG-63细胞内,同时使用慢病毒载体将空质粒转入对照组细胞内.通过CCK-8方法检测两组细胞增殖能力;流式细胞仪分析两组细胞的细胞周期及凋亡情况;Transwell实验测定细胞侵袭能力;RT-PCR测定两组细胞miR-145-3p和周期素依赖性蛋白激酶1(CDK1)的表达情况;通过Targetscan数据库和荧光素酶实验确定CDK1是否为miR-145-3p的靶基因;Western印迹法检测基因的表达水平.结果 miR-145-3p在骨肉瘤细胞系MG-63细胞中的表达量为(0.59 ± 0.24),较人成骨细胞系hFOB1.19细胞中的表达量(1.46 ± 0.21)明显降低,差异具有统计学意义(P ＜0.05).CCK-8结果显示,在48 h、72 h、96 h、120 h时,实验组细胞增殖能力较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P ＜0.05).流式细胞周期结果显示,处于G1期细胞数量为(69.92 ± 0.13)% ,较对照组(49.43 ± 0.09)%明显增多(P ＜0.05),而处于S期细胞数量(26.01 ± 0.08)% ,较对照组(40.67 ± 0.11)%明显减少,差异具有统计学意义(P ＜0.05).凋亡实验结果显示,实验组细胞的凋亡比率为(31.3 ± 4.7)% ,较对照组(9.35 ± 1.9)%明显增高,差异具有统计学意义(P ＜0.05).转染野生型CDK1后,实验组荧光素酶活性较对照组明显降低,差异有统计学意义(P ＜0.05);而转染突变型CDK1后,实验组荧光素酶活性较对照组无明显变化,差异无统计学意义(P ＞0.05).Western印迹实验结果显示,实验组中CDK1的表达量较对照组明显降低,且表达水平较对照组也明显降低(P ＜0.05).结论 miR-145-3p通过下调节 CDK1表达,抑制骨肉瘤细胞系MG-63细胞的增殖、侵袭能力,并促进其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭卫春	武汉大学人民医院骨科	98	458	10.0	17.0
2	余铃	武汉大学人民医院骨科	32	83	5.0	7.0
3	代国	武汉大学人民医院骨科	15	35	3.0	4.0
4	孙祥然	武汉大学人民医院骨科	4	6	2.0	2.0