猪伪狂犬病毒gB抗原侧向层析快速检测试纸条的研制

• 作者: 王东方 王华俊 王淑娟 王翠 班付国 谢彩华 赵雪丽 闫若潜 马震原
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 伪狂犬病毒 侧向层析 单克隆抗体 试纸条
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 85-90
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4519字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2018.12.021

摘要

为建立一种简便、快速、特异的猪伪狂犬病毒(PRV) gB抗原检测方法,利用单克隆抗体技术和侧向层析(LFA)技术,采用柠檬酸三钠还原法,制备颗粒大小为31.5 nm胶体金,再用胶体金标记纯化的抗PRV gB单克隆抗体10D4,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处,分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体6E9,组装成LFA方法通用胶体金层析试纸条.经测试,该试纸条最低能检测出1:640倍稀释的,TCID50为1×1086/0.1 mL的灭活PRV抗原,并与古典猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)均无交叉反应,特异性良好;室温干燥密闭的条件下,该试纸条至少可保存10个月.结果表明,本研究建立的试纸条方法操作简单、快速、敏感、特异,易于判定,适合基层PRV的大面积普查和现场检测.