下调细胞因子信号转导抑制因子3表达对2型糖尿病大鼠糖代谢影响的研究

• 作者: 余炜杰 吴鸣 张世杰 张旭 滕懿群 王琼 章爱莲 陆燕 陈俊国
• 来源期刊: 浙江医学
• 关键词: 细胞因子信号转导抑制因子3 RNA干扰 慢病毒 2型糖尿病 大鼠
• 年，卷（期）: 2018,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1926-1929
• 页数: 4页
• 字数: 3544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12056/j.issn.1006-2785.2018.40.17.2017-2774

摘要

目的 探讨RNA干扰(RNAi)技术下调肝脏和骨骼肌细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)表达对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢的影响.方法 构建并筛选SOCS3短发夹状RNA(shRNA)表达质粒,与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒.制备T2DM大鼠模型,采用随机数字表法分为对照组和干扰组各15只,于实验第1天和第15天对照组尾静脉注射非干扰序列慢病毒1.5ml/次,干扰组尾静脉注射SOCS3 RNAi慢病毒1.5ml/次.4周后检测大鼠空腹胰岛素(FINS)和空腹血糖(FPG)水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI)和胰岛素敏感指数(ISI);实时荧光定量PCR法和Western blot法检测大鼠肝脏和骨骼肌组织中SOCS3mRNA和蛋白表达水平.结果 成功构建了SOCS3 shRNA慢病毒表达质粒,其在C6大鼠神经胶质瘤细胞中可抑制SOCS3表达,其抑制率为70％,获得的慢病毒滴度为1.0× 109TU/ml.干扰组肝脏和骨骼肌组织中SOCS3 mRNA和蛋白表达水平较对照组均明显下降,差异均有统计学意义(均P＜0.01).干扰组FINS、FPG和IRI较对照组均明显下降,而ISI较对照组明显上升,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 利用RNAi技术下调T2DM大鼠SOCS3基因可提高T2DM大鼠胰岛素敏感性,缓解胰岛素抵抗程度.