M2型抗线粒体抗体的靶抗原三联体克隆表达技术改良

• 作者: 张婕婕 杨自华
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗线粒体抗体 肝硬化 自身免疫
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 1176-1179
• 页数: 4页
• 分类号: R575.2+2
• 字数: 3267字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2018.10.006

摘要

目的 改良构建M2型抗线粒体抗体(AMA-M2)靶基因三联体重组表达载体技术,建立检测AM A-M2的酶联免疫吸附法(ELISA)并进行评价.方法 通过聚合酶链反应(PCR)扩增基因三联体BPO,构建表达载体pGEX-4T-1-BPO,转入大肠杆菌BL21表达,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导得到重组蛋白,并通过亲和层析纯化得到目的蛋白,建立ELISA 检测AM A-M2.结果 获得纯度大于95% 的重组蛋白;检测326例临床样本,43例原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者中有41例呈AM A-M2阳性,灵敏度为95.3%(41/43),特异度为98.2%(278/283),PBC组与非PBC组的AMA-M2检出率差异有统计学意义(P<0.05).结论 该改良技术获取的目的蛋白可以用于 AMA-M2检测,AMA-M2对PBC的临床诊断具有较高的灵敏度和特异度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨自华	深圳市人民医院检验科	23	74	4.0	7.0
2	张婕婕	深圳市人民医院医务科	2	0	0.0	0.0