鸟分枝杆菌毒力相关因子EsxH对巨噬细胞凋亡的作用

• 作者: 何时义 凌敏 宁雪萍 张依 田爽
• 来源期刊: 微生物前沿
• 学科: 医学
• 关键词: 鸟分枝杆菌 EsxH 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 页码范围: 33-39
• 页数: 7页
• 分类号: R73

摘要

目的:通过原核表达系统制备鸟分枝杆菌EsxH蛋白,并将其作用于U937细胞,初步探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法:利用PCR扩增出EsxH编码序列,与表达载体pGEX-4T-3连接,构建重组载体pGEX-EsxH,将重组表达载体pGEX-EsxH转化入E. coli BL21 (DE3),在IPTG作用下诱导表达目的蛋白。用超声破碎仪对菌体进行破碎,取上清通过谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱纯化GST-EsxH融合蛋白。将纯化后的蛋白作用于U937细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:扩增出基因片段大小为294 bp的EsxH基因,克隆入表达载体pGEX-4T-3,经IPTG诱导后成功表达一个分子量大小为36.5 kDα的融合蛋白GST-EsxH。将不同浓度的EsxH蛋白作用于U937细胞,经流式细胞术检测细胞凋亡率,发现处理组细胞凋亡率高于对照组,其差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:EsxH蛋白能够促进U937细胞的凋亡,为进一步研究鸟分枝杆菌的致病机制奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凌敏		26	80	5.0	8.0
2	宁雪萍		3	1	1.0	1.0
3	田爽		2	0	0.0	0.0
4	张依		2	0	0.0	0.0
5	何时义		3	3	1.0	1.0