吗啡耐受大鼠脊髓蛋白质组双向电泳图谱的建立与差异蛋白鉴定

• 作者: 吴璟 和立穹 宋宗斌 李正弈棋 李茂玉 邓美玲 邢曼玉 邹望远 郭曲练
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: 吗啡耐受 蛋白质组学 NADH脱氢酶 伽玛烯醇化酶
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 麻醉与疼痛专栏
• 页码范围: 392-398
• 页数: 7页
• 字数: 4411字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2019.04.008

摘要

目的:建立吗啡耐受大鼠腰段脊髓组织蛋白质组双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)图谱,比较分析吗啡耐受大鼠腰段脊髓组织中蛋白质组的变化和差异表达,鉴定出差异表达的蛋白质点并进行验证.方法:将16只鞘内置管雄性SD大鼠随机分为吗啡耐受组(MT组,n=8)和生理盐水组(NS组,n=8),取其腰段脊髓组织蛋白以固相pH梯度等电聚焦(immobilized pH gradients isoelectric focusing,IPGIEF)为第一向,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electroporesis,SDS-PAGE)为第二向进行2-DE,应用PDQuest分析软件对考马斯亮蓝染色的2-DE图谱进行图像分析,对差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,并利用Mascot查询软件搜索Swiss-Prot数据库进行生物信息学分析.采用蛋白质印迹法验证部分差异蛋白.结果:MT组和NS组大鼠脊髓组织2-DE图谱中各分离出约1 000个清晰的蛋白质点,其中明显差异表达的蛋白有36个.采用MALDI-TOF-MS分析,并利用Mascot查询软件搜索Swiss-Prot数据库,共搜索到14个蛋白质,与NS组比较,MT组中表达下调的蛋白质点有2个,表达上调的蛋白点有12个.采用蛋白质印迹法对其中的NADH脱氢酶及伽玛烯醇化酶蛋白质点进行验证,结果与蛋白质组学结果一致.结论:初步建立了吗啡耐受大鼠脊髓组织蛋白质组双向电泳图谱,证明吗啡耐受可以引起脊髓中多种蛋白质的表达改变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭曲练	中南大学湘雅医院麻醉科	368	2456	21.0	34.0
2	李茂玉	中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室	10	36	5.0	6.0
3	邓美玲	中南大学湘雅医院麻醉科	2	4	1.0	2.0
4	宋宗斌	中南大学湘雅医院麻醉科	17	82	4.0	9.0
5	和立穹	中南大学湘雅医院麻醉科	1	0	0.0	0.0
6	邢曼玉	中南大学湘雅医院麻醉科	2	0	0.0	0.0
7	李正弈棋	中南大学湘雅医院麻醉科	1	0	0.0	0.0
8	吴璟	中南大学湘雅医院麻醉科	1	0	0.0	0.0
9	邹望远		1	0	0.0	0.0