慢病毒介导的USP9X基因RNA干扰对人胰腺癌细胞株裸鼠移植瘤生长的影响

• 作者: 任泽强 刘志毅 吴耐 周晓华 孙文白 张秀忠 张蓬波 徐盼 钱旭
• 来源期刊: 癌症进展
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 USP9X SW1990 慢病毒 survivin
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 905-909
• 页数: 5页
• 分类号: R735.9
• 字数: 5666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11877/j.issn.1672-1535.2019.17.08.10

摘要

目的 研究慢病毒介导的连锁的泛素特异肽酶9(USP9X)基因RNA干扰对人胰腺癌细胞系裸鼠皮下移植瘤的影响.方法 将靶向USP9X基因的干扰小RNA(siRNA)慢病毒(LV-siRNA-USP9X)和阴性对照慢病毒(LV-siRNA-NC)转染至SW1990细胞,并分别作为siUSP9X组和siNC组,未转染细胞作为对照组,分别将3组细胞系接种至裸鼠皮下,比较3组裸鼠接种第30天的移植瘤生长情况和瘤体重量.蛋白质印记(Western blot)法和免疫组织化染色检测3组裸鼠皮下移植瘤中survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI).结果siUSP9X组USP9X蛋白的相对表达量均明显低于siNC组和对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01),干扰效率约为90％.siUSP9X组裸鼠的肿瘤体积明显小于siNC组和对照组裸鼠,且随着接种时间的延长,差异越来越明显.在接种第30天时,siUSP9X组裸鼠瘤体重量均小于siNC组和对照组裸鼠,抑瘤率为52％.siUSP9X组sur-vivin蛋白的相对表达量和阳性表达率均低于siNC组和对照组,AI均高于siNC组和对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 慢病毒介导的 USP9X 基因沉默可明显抑制人胰腺癌细胞系裸鼠皮下移植瘤的生长,该现象可能与其下调 survivin 蛋白的表达并促进细胞凋亡有关,USP9X 有可能成为胰腺癌基因治疗的一个新靶点.