炭疽芽胞杆菌sigB基因缺失株的构建与研究

• 作者: 刘先凯 吕宇飞 王东澍 王恒樑 陈蒙 顾梦恩
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 芽胞杆菌,炭疽 sigB 抗热性 基因缺失
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 57-62
• 页数: 6页
• 分类号: R378.72
• 字数: 4448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2019.01.011

摘要

目的 构建炭疽芽胞杆菌A16R株sigB基因缺失突变株,通过分析其表型,为后续的炭疽杆菌生命过程展开系统性研究奠定基础.方法 采用同源重组技术以sigB为目标缺失基因,利用Golden-gate法构建含同源臂的打靶载体,结合基于I-SceⅠ酶驱动的芽胞菌高效敲除体系,筛选出炭疽杆菌sigB缺失突变株.通过生长曲线绘制、芽胞形成率测定、糖代谢能力比较,以及抗逆性实验等进行表型分析研究.结果 成功构建了炭疽杆菌sigB缺失突变株,发现SigB对细菌生长能力、芽胞形成率和糖代谢能力均无显著影响.在抗逆性实验中,经不同浓度H2O2作用下,与野生株相比,sigB缺失突变株抑菌环无明显差异.经过48与55℃处理后,与A16R野生株比较,sigB缺失突变株菌落数减少,说明sigB缺失突变株抗热性减弱.结论 成功获得了炭疽杆菌sigB基因缺失突变株.该研究表明SigB不影响芽胞形成,对细菌的抗热性有显著影响.