炭疽芽孢杆菌A16R株lysA基因缺失突变株的构建

• 作者: 冯尔玲 刘先凯 廖祥儒 朱力 王东澍 王恒樑 高飞
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 炭疽芽孢杆菌A16R株 同源重组 赖氨酸营养缺陷型
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 97-101,113
• 页数: 6页
• 分类号: R378.2
• 字数: 5268字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.02.004

摘要

目的 构建炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)A16R株lysA基因缺失突变株,为后续的定量蛋白质组学研究奠定基础.方法 以炭疽杆菌活疫苗A16R株lysA基因为目的缺失基因,利用软件设计上下游同源臂以及抗性基因的引物,用同源重组酶将3个片段连入质粒中,构建重组质粒,并将重组质粒导入炭疽杆菌A16R感受态细胞中,筛选炭疽杆菌A16R株lysA基因缺失突变株,对其进行验证.最后绘制缺失突变株和野生株生长曲线并进行生理生化分析.结果 成功构建了重组质粒,经同源重组后获得lysA基因缺失突变株.鉴定表明目的基因已经丢失.结论 成功获得炭疽杆菌A16R株lysA基因缺失突变株,为定量蛋白质组学研究奠定了基础,也为炭疽杆菌重要基因功能的研究建立了良好的技术平台.